论文部分内容阅读
目的：评价缺血再灌注后MMP-9的表达在血脑屏障变化中的作用，研究脑缺血再灌注脑组织MMP-9表达与血脑屏障变化的MRI表现之间的相关性。
方法：60只雄性SD大鼠(280～320g)，随机分成3组A、B、C组，A组为对照组(n=10)，B组为缺血2小时组(n=5×5)，C组为缺血6小时组(n=5×5)。采用改良Zea Longa线栓法建立大鼠可逆性大脑中动脉栓塞模型，单丝尼龙线置入颈内动脉，阻闭右侧大脑中动脉。B、C组分别于阻闭2h、6h后抽出尼龙线，恢复再灌注。于再通前及再通后2h、6h、24h、48h、72h，用Signa Profile 3.0T行大鼠脑冠状位MRI扫描。后断头取脑行HE、电镜、免疫组织化学SABC法测定MMP-9的表达情况。灌注加权 (perfusion weighted imaging，PWI)评价血流再灌注情况；T2WI测异常高信号相对信号强度、体积及对侧大脑半球的压迫指数(compressive factor,CF)评价血管源性水肿(Vasogenic brain edema，VBE)及T1Flair增强测强化程度反映血脑屏障开放；各BBB变化的MRI指标与标本免疫组化MMP-9的表达结果进行统计学相关分析。
结果：
①MRI灌注改变：A组(假手术组)T2WI、脑血流灌注时间信号强度曲线图(signal intensity-time curve，SI-TC)两侧对称，PWI伪彩图没有灌注缺损，相对负性增强积分值(relative negative enhancement integral，rNEI)两侧相等。再灌注前B组(缺血2h再灌注组)、C组(缺血6h再灌注组)脑血流灌注参数图上时间信号强度曲线图(SI-TC)右侧变浅宽，PWI伪彩图出现明显灌注缺损，rNEI小与对照组比较具有显著差异(P<0.05)；再灌注后B组灌注图像上，反映血较均匀恢复，rNEI逐渐上升，再灌注后48h血流rNEI值基本恢复，与对照组比没有统计学差异(P>0.05)，C组再灌注6h出现rNEI值明显上升出现高峰，一过性高灌注，后逐渐下降，血供呈不均匀恢复。
②血脑屏障开放的MRI改变：组(假手术组) T2WI，增强T1flair未示异常。B组(缺血2h再灌注组)再通T2WI未示异常，增强T1flair未示异常，再灌注后2h出现高信号增强灶，于灌注后6h及24～48h出现增强的两个高峰，再灌注后2h T2WI上病变逐渐出现，底节与额顶叶rSI、高信号体积、对侧大脑半球的压迫指数逐渐增高，至24～48h达到高峰；第72h虽然VBE的表现仍然明显，但已开始减轻。C组(缺血6h再灌注组)再通前2例(40％)T2WI出现异常高信号，增强出现轻微强化，再灌注后增强改变、VBE变化趋势同B组，程度较B组更明显(P<0.05)。 ③免疫组织化学上，假手术组和缺血对侧脑组织内血管内皮极低表达；B组、C组在再灌注后2h缺血侧的血管内皮细胞上可见MMP-9阳性表达，随着缺血后时间的推移，阳性着色逐渐加深，再灌注48h表达最强，再灌注72h仍维持较高水平，其对应的组织学上主要为血管源性水肿和血脑屏障基底膜的破坏、紧密连接的消失。
④BBB变化的MRI指标(T2WIrSI、异常高信号体积、CF，T1WI强化程度)与标本免疫组化MMP-9的表达结果呈正相关。
结论：脑缺血再灌注后MMP-9在血管内皮的阳性表达与血脑屏障的破坏相关。缺血再灌注各时间点血管内皮细胞MMP-9表达增强与其血脑屏障变化的MRI征象密切相关。