【摘 要】
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细胞内物质运输是细胞生命活动的基础,其主要形式是囊泡运输,在时空特异性和荷载蛋白特异性层面都需要精确调节。对内体系统起调节作用的蛋白中,最典型的是Sorting nexin蛋白家
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细胞内物质运输是细胞生命活动的基础,其主要形式是囊泡运输,在时空特异性和荷载蛋白特异性层面都需要精确调节。对内体系统起调节作用的蛋白中,最典型的是Sorting nexin蛋白家族。关于这个蛋白家族,目前主要的研究是关于于它作为蛋白质逆向运输复合体(Retromer)的组分时的功能。 本研究同时关注Sorting nexin发挥功能的新机制和传统Retromer的功能。我们发现,Sorting nexin家族成员SNX9在果蝇中的同源基因CG6757(Dsnx9)纯合突变时,能够引起雄蝇不育。通过对CG6757纯合突变体Dsnx91免疫染色和电镜观察,我们初步确定精子发生被阻断在个体化过程,并且与微丝蛋白组装有关,而与传统Retromer的功能无关。为了研究Dsnx9在精子发生中发挥功能的具体机制,我们把DSNX9蛋白的主要结构域分别截掉,用突变体蛋白进行拯救实验,发现低复杂度区的第一段以及BAR结构域共同参与此过程。由于DSNX9在各组织中广泛表达,而Dsnx91的表型却是生殖系统特异的,我们推测有精巢特异的蛋白与DSNX9相互作用,因此用DSNX9为诱饵蛋白,进行了精巢蛋白质谱分析。质谱分析提示,某些膜泡运输蛋白和自噬相关蛋白可能参与此过程。更加具体的机制有待进一步研究。此外,我们对Dvps26和Dvps29用P因子转座法进行了敲除,并得到了完全突变体。 这些发现,不仅为为将来进一步探讨Sorting nexin家族蛋白的功能奠定了良好的基础,对相关疾病如雄性不育的治疗也将有重大意义。
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