甜瓜蒂的化学成分及其制剂的质量标准

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目的:对甜瓜蒂进行较为系统的化学成分研究,并对以甜瓜蒂提取物制备而成的单味制剂-戒酒灵口服液进行质量标准研究。  方法:首先采用乙醇提取甜瓜蒂,提取液浓缩后得浸膏;将浸膏用水分散后,分别用乙酸乙酯和正丁醇进行萃取,将萃取液浓缩得到乙酸乙酯层浸膏和正丁醇层浸膏;水层部分浓缩得到水层浸膏。而后分别取乙酸乙酯层浸膏和正丁醇层浸膏,经硅胶柱色谱,采用二氯甲烷-甲醇系统进行梯度洗脱,以达到初步分离的目的,再通过硅胶柱色谱、ODS色谱、Sephadex LH-20柱色谱和分析型高效液相及制备型高效液相色谱仪等方法进行化学成分分离、纯化,最后利用理化常数,波谱学方法(核磁共振)进行结构鉴定。在戒酒灵口服液质量标准研究中,采用薄层色谱法,以环己烷∶乙酸乙酯=3∶2为展开剂,在紫外灯(254 nm)下对戒酒灵进行薄层鉴别;采用高效液相色谱法,以乙腈-0.2%冰醋酸溶液为流动相,检测波长为234 nm,测定戒酒灵口服液中有效成分葫芦素B和葫芦素E的含量。  结果:  (1)从甜瓜蒂中分离得到了13个单体化合物,鉴定了9个化合物的化学结构,分别为:粘霉烯醇(glutinol,1),(6S,9S)6-羟基-3-酮-a-紫罗兰醇-9-O-β-D-葡萄糖苷[(6S,9S)6-hydroxyl-3-oxo-a-ionol-9-O-β-D-glucopyranoside,2],尿嘧啶核苷(uridine,3),β-D-葡萄糖乙苷(ethyl-β-D-glucopyranoside,4),葫芦素B(cucurbitacin B,5),葫芦素B-2-O-β-D-葡萄糖苷(2-O-β-D-glucopyranosy cucurbitacin B,6),葫芦素D(cucurbitacin D,7),β-谷甾醇(β-sitosterol,8),胡萝卜苷(daucosterol,9)。  (2)戒酒灵口服液的薄层色谱鉴定结果显示,戒酒灵制剂中含有与甜瓜蒂相同的化学成分,并含有葫芦素B和葫芦素E。高效液相含量测定中,建立了葫芦素B和葫芦素E的线性回归方程,分别为y=8427.2x+9.1469(r=0.9999)和y=9601.1x+1.7599(r=0.9999),葫芦素B和葫芦素E质量浓度分别在0.01574~0.3148mg/mL和0.003744~0.07488 mg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为97.7%(RSD=1.29%,n=6)和98.4%(RSD=1.68%,n=6)。戒酒灵口服液中葫芦素B和葫芦素E的平均含量分别为0.36 mg/mL(RSD=0.85%,n=6)和0.033 mg/mL(RSD=0.78%,n=6)。  结论:化合物1、2、3均为首次从甜瓜属植物中分离得到,化合物4为首次从甜瓜蒂植物中分离得到。以单味药材甜瓜蒂提取物制备的戒酒灵口服液符合医院制剂规范,质量标准研究方法简便、快捷、准确、可靠。
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