烟草黄叶突变体遗传特性及其分子标记的研究

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本研究以烟草花药离体培养中发现的黄叶突变体为材料,黄叶突变材料是在2000年利用烤烟品种G28和烤烟品种NC2326杂交F1植株的花药离体培养中得到的,是较为稀有的种质材料。在基础方面研究烟草叶绿素合成代谢过程、叶绿体发育机制、光合膜与光合功能系统建成、叶绿体发育相关基因的表达、调控和克隆等和在应用方面减少烘烤次数、省工降本、节本增效等具有非常重要的价值。  本文研究了该突变材料的形态特征、主要农艺性状、光合特性及其黄叶性状的遗传特点,并利用SRAP标记对该黄叶突变基因进行了标记。主要结果如下:  1、烟草黄叶突变体的表型特征是:叶色为黄绿色,植株高度和生育期与正常绿色品种K326相近,此突变体从幼苗开始整株就呈现黄叶性状,在与绿色品种混播的情况下,长势与正常绿色品种相近。  2、在伸根期、团棵期和旺长期3个不同的发育期,黄叶突变体的光合色素含量较正常绿色品种K326都表现为下降,其中叶绿素含量下降32.7~37.1%,类胡萝卜素含量下降9.2~15.7%,叶绿素a和叶绿素b分别下降32.3~37%和41.5~48.3%。叶绿素含量下降幅度比类胡萝卜素大,叶绿素b含量的下降幅度又比叶绿素a大,其中突变体的叶绿素a/b值为3.0~3.3大于正常绿色品种K326的2.4~2.6,类胡萝卜素/叶绿素比值为0.143~0.167大于正常绿色品种K326的0.114~0.128。只有当烟叶成熟落黄时,叶片中的光合色素含量才相当。  3、在伸根期、团棵期和旺长期3个不同的发育期,突变体的净光合速率、蒸腾速率和气孔导度也低于正常绿色品种K326,突变体的净光合速率为8.29~12.67μmol·m-2·s-1,正常绿色品种K326的净光合速率为11.09~16.91μmol·m-2·s-1,突变体的净光合速率为正常绿色品种K326的71~74%,而突变体的胞间CO2的浓度达到302~304μmol·mol-1则高于正常绿色品种K326的272~277μmol·mol-1。  4、采用黄叶突变体与正常绿色品种K326的正反交F1、F2、BC1进行遗传分析,结果表明:正反交F1代的叶色均表现为正常绿色;F2代正反交正常绿苗和黄叶苗的分离比例为15.48∶1和16.07∶1,以黄叶突变体作为轮回亲本的BC1代正常绿苗和黄叶苗的分离比例为2.94∶1和3.10∶1,经X2检验,P均值大于0.05,那么F2代正常绿苗和黄叶苗的分离比例均符合15:1期望值,BC1代正常绿苗和黄叶苗的分离比例均符合3:1期望值。结果表明该黄叶突变体的叶色性状是由2对隐性核基因控制。  5、选取黄叶突变体与K326的F2代作为定位群体,用228对SRAP引物对亲本黄叶突变体和K326的DNA进行分析,然后用在两亲本间表现出多态性的引物扩增绿苗和黄叶苗近等基因池,再用在池中检测到多态的引物扩增F2群体,获得了一个与该突变基因紧密连锁的SRAP标记me5/em7,遗传距离为10.38cM。
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