【摘 要】
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将患病雏鹅的肝脏、肠粘膜及内容物制备病料样本,通过12日龄非免疫鹅胚接种与传代,第六代鹅胚的致死率达到95.3％,感染胚胎出现有规律的特征性病变,即肝土黄色,心肌苍白.采用琼
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将患病雏鹅的肝脏、肠粘膜及内容物制备病料样本,通过12日龄非免疫鹅胚接种与传代,第六代鹅胚的致死率达到95.3％,感染胚胎出现有规律的特征性病变,即肝土黄色,心肌苍白.采用琼脂扩散试验从感染鹅胚尿囊液中检出小鹅瘟病毒抗原;PCR结果显示从尿囊液的核酸提取物中扩增出特异性的DNA片段;以感染鹅胚尿囊液人工接种5日龄健康雏鹅,复制出与自然感染病例相类似的病变.本次试验从患病雏鹅的病料样本中分离鉴定出一株小鹅瘟野生强毒,其核酸分子量经测定为5000bp,含三条结构蛋白,VP<,1>、VP<,2>和VP<,3>依次为88KD、68KD和57KD,其中VP<,3>是小鹅瘟病毒的主要衣壳蛋白.本次试验建立了两种血清学检测方法和一种分子生物学技术.制备的小鹅瘟沉淀抗原可以检测患病雏鹅血清中的抗体,监测治疗血清的滴度和疫苗接种的效果.标记的小鹅瘟荧光抗体直接检测患病雏鹅组织中的病毒抗原,为禽病诊断提供了快速、灵敏和特异性的实用技术.针对编码主要结构蛋白VP<,3>的基因合成一对引物,扩增结果与预期设计的长度基本相符;酶切分析表明扩增产物系编码VP<,3>的基因片段;而且这一对引物能够特异性地扩增小鹅瘟病毒的核酸,与其它禽类病毒核酸不发生交叉反应.本次试验建立的PCR方法使我省小鹅瘟的诊断,监测和防制工作上升到分子生物学水平.
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