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目的：白化病是一组以黑色素缺乏为主要临床表现的常染色体隐性遗传病,在中国白化病各分型中以TYR基因突变所引起的眼皮肤白化病Ⅰ型(OCA1)最常见,本研究对临床诊断为眼皮肤白化病(OCA)患者进行TYR基因突变筛查,以了解我国大陆眼皮肤白化病患者TYR基因突变类型及基因突变谱,并探讨新突变TYR基因的致病性。
方法：①收集41例中国白化病患者及其家系临床资料及外周血:②蛋白酶K/SDS法从外周血中提取基因组DNA,利用PCR技术扩增患者及其家系成员的外显子和外显子一内含子交界区,以DNA序列测定技术进行突变筛查于鉴定;③针对新发现的突变,通过对100例无白化病表型且无亲缘关系的正常中国人进行新突变等位基因筛查,以排除基因多态性。④运用CLUSTERX、Scanprosite、PredictProtein等生物信息学软件对OCA1新突变基因进行突变蛋白的结构和功能方面的预测与分析。
结果：①在41例OCA患者中经分子诊断结果为OCA1占58.5%(24/41),共发现21种TYR基因改变,其中R299H占全部检出率为29.5%(13/44),为出现频率最高的突变方式。②在查明44个TYR突变等位基因中,位于TYR基因第一外显子和第二外显子,其频率分别占36.36%(16/44)、45.45%(20/44),表明TYR基因的第一外显子和第二外显子为其突变热点。③24例OCA1患者中,20例携带2个突变等位基因,3例携带1个突变等位基因,1例为罕见携带3个突变的混合型白化病。④在TYR基因突变筛查中,发现4种新突变,其中3种错义突变(I151s,A241T和N364K),1种插入突变(c.216delA);在SLC45A2基因上发现1种新的无义突变(Y70X),这些突变为至今尚未报道的新突变,通过对新突变进行分析,推测其极可能为病理性新突变。
结论：本研究阐明了中国眼皮肤白化病TYR基因及其突变谱,发现中国OCA1突变谱具有种族特异性,且TYR基因存在有突变热点。我们发现4个TYR致病性新突变和1个SLC45A2致病性新突变,丰富了人类白化病基因突变数据库,并为我国今后开展白化病优生与遗传咨询累积了实践经验。如何全面了解TYR突变基因及蛋白功能的关联将是后续研究需要着重解决的问题。