【摘 要】
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将除草剂抗性基因转入水稻(Orysa Sativa,L)(Japonica)中,获得转基因水稻植株.优化了基因枪法水稻遗传转化的各种参数,明确了BASTA除草剂选择压的最适浓度和筛选时间.研究了
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将除草剂抗性基因转入水稻(Orysa Sativa,L)(Japonica)中,获得转基因水稻植株.优化了基因枪法水稻遗传转化的各种参数,明确了BASTA除草剂选择压的最适浓度和筛选时间.研究了组织培养因素对水稻愈伤组织分化能力的影响.结果如下:1.愈伤组织经长期继代培养,需要降低培养基2.4-D浓度,同时使用NAA和少量KT,以保持愈伤组织较强的胚胎发生能力.2.愈伤组织在分化前进行适当的干燥、脱水处理,可以提高愈伤组织的分化能力.该实验采用脱水处理时间为16小时,这样可以促进愈伤组织的再生分化能力,使其分化频率高达80-90﹪.3.Basta除草剂明显抑制水稻愈伤组织的生长.除草剂的选择压力确定为5mg/L.4.基因枪法转化的最佳参数为:DNA-金弹与受体细胞的距离为9厘米,轰击次数两次.5.该研究以成熟胚愈伤组织为受体进行基因转化,获得了转基因水稻植株.6.通过对水稻转化植株的叶片Gus染色,Basta叶片涂布试验及PCR检测,初步证实外源bar基因存在并整合到水稻基因组中.
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