利用噬菌体肽库筛选胰凝乳蛋白酶抑制剂、底物及成纤维细胞生长因子拮抗剂的研究

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该论文中研究小组以噬菌体肽库技术为基础,根据不同的研究需要设计实施了相应的筛选方案,从而成功地筛得了胰凝乳蛋白酶的短肽抑制剂、底物及成纤细胞生长因子(FGF)的短肽拮抗剂.比氨酸蛋白酶的短肽抑制剂具有重要的临床应用价值.研究小组以胰凝乳蛋白酶为模型酶,设计了一种从噬菌体肽库中筛选蛋白酶短肽抑制剂的新方法.这种方法在通常亲和筛选的基础上,将底物噬菌体切割除去,再通过噬菌体抑制活力分析鉴别出表达活性短肽的噬菌体克隆.为了探讨短肽抑制剂与胰凝乳蛋白酶间可能的相互作用,研究小组采用该实验室王玉宏等人建立的一种国际领先的计算模型进行了计算机结构计算.圆二色谱是研究溶液中蛋白质分子与其短肽配体的结合及相互作用的有力手段,该论文中研究小组采用该技术对胰凝乳蛋白酶与短肽Ac-ASRVPRRG-NH<,2>的相互作用进行了研究.另一方面,该论文中还利用噬菌体肽库技术对胰凝乳蛋白酶的亚部位专一性进行了初步研究.该研究还首次发现了胰凝乳蛋白酶的底物保守顺序:YF或WR.该论文中研究小组模拟体内FGF与其受体的识别作用机制,设计了一种筛选FGF受体结合部位亲和配体的方法:先以固定化的生物素化肝素结合FGF,再加入噬菌体十五肽库进行亲和筛选,并通过肝素小皿预筛及肝素专一性洗脱尽量排除筛选到肝素结合的噬菌体的可能性.
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