转Bt cry1Ah基因抗虫玉米的分子检测及农艺性状分析

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在前期工作中,利用农杆菌介导法将具有自主知识产权的Bt cry1Ah基因转入玉米自交系综31中,获得了1764株转基因植株,并通过筛选获得了2株对玉米螟有显著抗性的转基因植株,分别命名为G186和K60。本研究对2个转基因事件进行了PCR、Southern Blot、RT-PCR、Western Blot、ELISA、试纸条等分子检测分析,证明了cry1Ah基因整合到了玉米的基因组中,G186是以多拷贝的形式插入玉米基因组的,K60是以双拷贝的方式插入基因组中的,并且能够在玉米的根、茎、叶、雄穗、雌穗等部位正常高效表达。  对这两个高抗植株进行了室内和田间抗虫性分析,分析结果表明,这两个转基因株系对亚洲玉米螟的抗性达到高抗水平。  对这两个事件进行了遗传稳定性分析,对T2-T4代转基因株系的跟踪检测结果表明这两个转基因事件外源cryAh基因可以稳定遗传到下一代。  研究了G186事件杂交后代的农艺性状。株高、穗位高、穗长、穗粗等与非转基因对照植株相比差异不大,秃尖长明显短于对照,千粒重及单株产量明显高于对照,这种差异在人工模拟虫害爆发情况下达到极显著水平。  以上研究证明,G186和K60转基因事件可以应用于玉米的抗虫育种。
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