基于Nrf2/ARE通路探讨祛瘀解毒法对子宫内膜异位症患者卵细胞质量的影响

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目的:观察分析祛瘀解毒法对子宫内膜异位症(endometriosis,EMS)患者Nrf2/ARE通路中关键效应分子Nrf2(NF-E2-related factor 2)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)表达干预作用,从氧化应激角度出发,寻找祛瘀解毒方发挥抗氧化应激的可能作用靶点,试图对其抗氧化机制做出一定的解释。方法:选取66例符合本实验研究标准的EMS患者,按照随机数字表法均分为实验组(祛瘀解毒颗粒+IVF)33例、观察组(桂枝茯苓胶囊+IVF)33例。同时,选取单纯因男方因素行IVF患者33例(安慰剂+IVF)为对照组。三组患者均口服各组药物三个月。比较实验组与观察组治疗前后血瘀蕴毒症候积分和血清糖类抗原125(CA125)水平变化,比较三组患者获卵数、受精率、优胚数、优质胚胎率,采用实时定量荧光技术(RT-PCR)测定颗粒细胞中Nrf2、SODmRNA表达,蛋白质印记法(Western-blot)测定颗粒细胞Nrf2、SOD蛋白表达,硫代巴比妥酸法(TBA)测定颗粒细胞中MDA含量。结果:1.实验组和观察组治疗后血瘀蕴毒症候积分均下降,有统计学意义(P<0.05),实验组较观察组下降幅度更大,有统计学意义(P<0.05)2.三组患者获卵数、优胚数、受精率、优胚率的比较:对照组较实验组、观察组获卵数、优胚数、受精率、优胚率高,均有统计学意义(P<0.05);实验组较观察组优胚数、受精率、优胚率高,更接近对照组,有统计学意义(P<0.05);实验组较观察组获卵数略高,更接近对照组,但无统计学意义(P>0.05)3.三组患者卵巢颗粒细胞中Nrf2和SOD表达有差异,有统计学意义(P<0.05):对照组较实验组、观察组表达下调,实验组较观察组表达上调4.三组患者颗粒细胞中MDA含量比较有差异,有统计学意义(P<0.05):对照组较实验组、观察组含量低,实验组较观察组含量低,更接近对照组结论:1.祛瘀解毒法可明显改善行IVF周期EMS患者血瘀蕴毒症候,降低血清CA125含量,提高患者受精率、优胚数、优胚率2.子宫内膜异位症患者较正常人存在更高的氧化应激3.祛瘀解毒法可能通过Nrf2/ARE通路,以Nrf2为作用靶点,提高卵巢颗粒细胞中关键效应分子Nrf2、SOD基因及相关蛋白的表达,降低了颗粒细胞中MDA含量,从而抑制了卵细胞氧化应激,解除有害物质对卵细胞的毒害作用,从而提高了卵细胞质量和胚胎质量4.祛瘀解毒法可能通过Nrf2/ARE通路抑制氧化应激作用,部分阐释了“祛瘀解毒、通络止痛”治法的科学性和合理性,丰富了“血瘀蕴毒”理论的研究。
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