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论文以奶牛乳腺上皮细胞为模型，研究了赖氨酸(Lys)对乳蛋白合成的影响及其机制，探讨了Lys在乳腺中的代谢走向，为定向调控乳蛋白合成及改善乳品质提供一定的理论依据。 1.Lys在奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白合成中的作用 试验以泌乳中期荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞为模型，培养细胞至融合度80％后，用无Lys和无血清的培养基饥饿细胞，使细胞处于同一分化状态。培养基中添加不同浓度的Lys（0、0.5、1.0、1.5、2.0、5.0和10mM）培养细胞6h、12h和24h。利用CCK8法检测细胞活力，筛选处理细胞最适宜的时间及浓度;利用同位素示踪技术L-[ring-3H5]Phenylalanine检测Lys对奶牛乳腺上皮细胞总蛋白周转的影响;通过RT-qPCR和Western Blot检测β-酪蛋白以及乳蛋白合成相关信号通路因子的表达丰度。结果显示:Lys浓度为1.0mM培养24h时，细胞活力最高;Lys可有效促进细胞总蛋白合成，降低细胞总蛋白降解率;1.0mM Lys能够有效提高β-酪蛋白的表达;添加1.0mM Lys可显著提高JAK2-STA5、mTOR等信号通路基因表达。结果提示:Lys通过促进蛋白周转和乳腺上皮细胞增殖，激活JAK2-STAT5和mTOR等信号通路，提高乳蛋白的合成量。 2.奶牛乳腺上皮细胞中Lys吸收机制研究 试验研究了可转运Lys的可能氨基酸(AA)转运载体(CAT-1、b0，+AT/rBAT、y+LAT1/4F2hc、y+LAT2/4F2hc和ATB0，+)在奶牛乳腺上皮细胞中的表达及Lys对其表达的影响。结果显示:奶牛乳腺细胞中CAT-1、y+LAT2/4F2hc和ATB0，+均有表达，未发现b0，+AT/rBAT，y+LAT1/4F2hc的表达;Lys能够显著提高奶牛乳腺上皮细胞ATB0,+的表达，且ATB0,+的表达量显著高于CAT-1，y+LAT2/4F2hc;抑制ATB0，+的转运活性，β-酪蛋白表达明显下降，提示ATB0,+在Lys转运的过程中发挥重要作用。 3.奶牛乳腺上皮细胞中Lys代谢机制研究 试验采用同位素示踪技术，利用L-[14C(U)]Lys检测奶牛乳腺上皮细胞中Lys的代谢去向，采用0.5、1.0、1.5和2.0mM Lys孵育细胞3h后，RT-qPCR和Western Blot检测Lys对其代谢关键酶（LKR和SDH）表达的影响。结果显示:奶牛乳腺上皮细胞中Lys被用于合成蛋白质的比例占80％以上，转化成天冬氨酸(Asp)和组氨酸(His)的比例分别为3％-4％，生成CO2的比例为3％-5％;1.5mM Lys明显提高其代谢酶LKR和SDH mRNA及AASS蛋白表达。结果提示，Lys在乳腺中大部分被用作底物合成蛋白质，少部分转化为非必需氨基酸(NEAA)和氧化供能，浓度为1.0mM时合成蛋白效率最高。 综上所述，Lys可能通过促进奶牛乳腺上皮细胞增殖，激活JAK2-STAT5和mTOR信号通路提高奶牛乳腺上皮细胞细胞蛋白周转和乳蛋白合成;研究发现ATB0,+、CAT-1和y+LAT2/4F2hc在奶牛乳腺上皮细胞中均有表达，且ATB0，+在奶牛乳腺上皮细胞Lys转运中发挥了重要作用;进入细胞的Lys主要用作底物合成蛋白质，极少量转化为Asp和His及氧化成CO2，Lys代谢关键酶（LKR和SDH）在这个过程中发挥重要作用。