猪瘟是由猪瘟病毒（Classical swine fever virus,CSFV）引起的一种高发病率和高死亡率的传染病,每年导致养猪业巨大的经济损失。CSFV的E2蛋白是其最重要的保护性抗原。因此,E2蛋白是建立CSFV检测方法和研究新型疫苗的最主要目标蛋白。建立快速有效的CSFV抗体间接ELISA检测方法有助于实时监测猪群CSFV抗体水平,及时掌握免疫情况并调整免疫程序。而CSFV新型疫苗以其抗原性强,含量稳定以及利于区分野毒等优点而越来越受关注。本研究分以下3个部分:1.将密码子优化后的E2蛋白非跨膜区（命名△E2）的DNA片段克隆到原核表达载体p ET32a（+）上,构建成p ET32a-△E2表达质粒,并转化E.coli BL21（DE3）。IPTG诱导表达后,△E2蛋白主要以包涵体的形式表达。将包涵体用8 mol/L的尿素进行变性,采用分步透析的方法将变性蛋白进行复性。复性后的△E2蛋白可被CSFV阳性血清识别,具有较好的反应原性。2.将△E2蛋白作为抗原包被酶标板,经条件优化后,建立了检测猪血清CSFV抗体的间接ELISA方法。该方法的敏感性为81.58%,特异性为91.67%,与IDEXX CSFV抗体ELISA检测试剂盒的符合率为84.24%。本研究为临床猪血清CSFV抗体检测提供了参考方法。3.首次将△E2基因的N端连接大肠杆菌成孔蛋白（Cly A）基因的C端,而后克隆到表达载体p BAD18-Cm上,建立了重组表达质粒p BAD18-Cm-Cly A-△E2,并转化E.coli DH5α。将该重组菌用0.2%的阿拉伯糖诱导,用超高速离心法提取递呈CSFV△E2蛋白的外膜囊泡重组（Outer membrane vesicles,OMVs）。经透射电镜拍摄、质谱鉴定、SDS-PAGE以及Western-blot分析发现,该重组菌分泌了重组OMVs,且△E2蛋白递呈在重组OMVs的外表面。结果表明,利用Cly A基因作为引导序列,可将CSFV△E2蛋白递呈于OMVs表面。将重组△E2蛋白、重组OMVs以及猪瘟病毒兔化弱毒免疫家兔,主要探索了递呈CSFV△E2蛋白的重组OMVs的免疫特性。结果表明,相比另外两种疫苗,递呈CSFV△E2蛋白的重组OMVs能快速刺激家兔产生抗体（P<0.05）,且能更好地激发细胞免疫（P<0.01）。说明OMVs呈递的CSFV△E2蛋白可作为CSFV的一种候选疫苗。