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猪圆环病毒(PCV)包括PCV-1和PCV-2两种基因型,PCV-2能引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎与肾病综合征(PDNS)、增生性坏死性肺炎(PNP)、繁殖障碍等疾病。PMWS患猪渐进性消瘦、呼吸困难、腹泻,怀孕母猪感染后经胎盘传染给仔猪。PCV-2在我国猪场广泛存在并造成了巨大的经济损失。1、试验目的检测猪圆环病毒2型(PCV2)灭活疫苗安全性及免疫力,评价由福州大北农生物技术有限公司生产的PCV2灭活苗的临床应用效果。2、试验方法包括试验前检查、疫苗的实验室安全检验、免疫效果检测和临床免疫试验四个方面。(1)试验前检查:对疫苗进行外观、剂型、稳定性、粘度和汞类含量进行测定。检测试验猪PCV2抗原和PCV2抗体,选取PCV2抗原、PCV2抗体均为阴性的猪用于本试验。(2)实验室安全检验:14-21日龄健康仔猪4头,肌肉注射疫苗2.0ml,观察14日。(3)实验室免疫效果检测:14-21日龄健康仔猪15头。随机分为3组,每组5头。第1组为免疫组,注射灭活苗,14日后加强免疫1次。第2组为攻毒对照组,接种圆环病毒。第3组为空白对照组,不免疫不攻毒。3组猪隔离饲养。二免后第21日,用DBN-SX07株病毒液(含105.0TCID50/ml)对第1、2组猪攻毒,逐日测定体温并观察25日。二免后第21日,对所有猪采血,测定血清中的PCV2抗体效价。攻毒到期后对所有猪进行病理剖检。(4)临床免疫试验:试验猪450头,包括商品仔猪350头,后备母猪60头,经产母猪40头,进行低剂量、推荐剂量和超剂量免疫,观察猪只的临床状况、全身和局部不良反应,检测商品猪死亡率和免疫后PCV2抗体水平,并每组随机抽取5头进行病理剖检。3、试验结果(1)疫苗的试验前检查表明:疫苗外观、剂型、、稳定性、黏度、汞类含量、无菌检验等均合格。(2)安全检验表明:所有免疫猪健活,精神状态、行为活动和饮食正常;呼吸和体温均正常,无全身和局部不良反应。免疫效力检验表明,猪二免后21日免疫组PCV2抗体滴度≥1:800,攻毒后25日免疫组4/5保护,对照组3/5发病。尸体剖检结果显示,攻毒组出现肺实变,肠系膜淋巴结肿大;免疫组、空白对照组均未见明显病变。(3)临床免疫试验表明:所有免疫猪精神状态、行为活动和饮食正常;呼吸和体温均在正常范围内;无全身反应,接种部位无其它不良反应。商品仔猪平均日增重统计结果表明,免疫组平均日增重均比对照组明显提高,差异显著。所有注射疫苗种母猪妊娠、分娩和泌乳情况均正常,平均产仔数与初生重与对照组相比无明显差异。剖检超剂量接种猪,未见明显病变。商品猪免疫组的死亡率均小于对照组,差异显著。(4)免疫前的抗体检测结果表明:各猪场均有部分试验猪PCV2抗体阳性,但抗体滴度较低。接种疫苗后14日,商品仔猪体内即可检测到PCV2抗体,抗体阳性率为40.0%-50.0%;免疫后35日,抗体阳性率为80%以上,平均抗体滴度1:1800-1:2000,达到保护标准。此后5个月进行的抗体检测,平均抗体滴度均在保护标准(1:800)以上。免疫种母猪所产仔猪28日龄时平均母源抗体滴度为1:1720-1:1800,35日龄时降至1:800。4、试验结论:试验用灭活苗安全性良好,商品猪、怀孕母猪免疫后无不良反应。该灭活苗免疫后可产生良好的免疫保护作用。