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卡介菌多糖核酸(Bacillus Calmette-Guerin-polysaccharide-nucleic acid BCG-PSN)是我国首创的新型治疗和免疫调节剂,它能够提高T淋巴细胞的免疫功能,通过激活T淋巴细胞促进白细胞介素等分泌,产生多种免疫调节的淋巴因子,增强巨噬细胞的功能,提高机体免疫细胞杀伤细菌、病毒等病原体的能力,提高溶菌酶活力。经临床验证,BCG-PSN已成为目前预防和治疗慢性支气管炎、哮喘、感冒、风湿性关节炎、神经性皮炎等的理想药物。但关于卡介菌多糖核酸制备条件的优化和其毒理学作用研究目前还比较少见。本文拟对BCG-PSN的制备条件的优化和毒理学作用进行初步研究,为BCG-PSN的制备及其在临床上的应用提供科学的参考依据。1BCG-PSN的制备及质量控制BCG-PSN是从卡介菌中提取的一种具有免疫调节功能的物质,临床应用表明其具有较好的疗效。本文设计苯酚浓度、苯酚温度、苯酚次数和乙醇倍数四个影响提取效果的试验因素,并分别设立三个实验水平进行正交试验,采用超声破碎、热酚法去除蛋白质提取BCG-PSN,测定多糖和核酸含量,进行方差分析,同时进行精密度考察和重现性考察,用25%磺基水杨酸检测蛋白,以确定BCG-PSN提取的最优条件。结果显示,苯酚浓度为90%,苯酚次数为1次,苯酚温度为60℃,乙醇为7倍量时为最优提取条件,磺基水杨酸检测蛋白呈阴性。2BCG-PSN毒理学作用的研究本试验对BCG-PSN的急性毒性、亚慢性毒性和致突变作用进行了研究。采用固定剂量法结合最大溶解度进行急性毒性试验；连续2周给小鼠腹腔注射BCG-PSN进行亚慢性毒性试验；同时对小鼠的骨髓微核和精子畸形进行研究评价其致突变毒性。结果显示,在最大溶解度2000mg.kg-1.bw-1的剂量范围内,小鼠仅出现轻微的中毒症状,未出现死亡,故BCG-PSN小鼠腹腔注射的LD5o>2000mg.kg-1·bW-1;亚慢性毒性试验中小鼠在整个试验周期内反应灵敏、活动正常且未出现死亡；高剂量组和中剂量组小鼠采食量在前期显著低于对照组(p<0.05),后期差异不显著(p>0.05),高剂量组小鼠体重在试验前期与对照组差异显著(p<0.05)；器官指数除高剂量组脾脏在整个试验周期内显著高于对照组外(p<0.05),其他指标均差异不显著(p>0.05)；血常规检查发现高剂量组和中剂量组白细胞总数、红细胞总数、血红蛋白、红细胞压积和平均红细胞容积显著低于对照组(p<0.05)；血液生化检测结果显示,试验前期高剂量组血液尿素氮显著高于对照组(p<0.05),试验后期试验组除白蛋白均显著低于对照组(p<0.05)外,其他各指标差异不显著(p>0.05)。病理组织学检查：肝脏和肾脏组织学结构正常；小鼠骨髓微核试验和精子畸形试验结果均呈阴性。结论：BCG-PSN在最大溶解度范围内无急性毒性,长期大剂量应用BCG-PSN可出现贫血,无致突变作用。