目的:通过定量评估还原剂对生物大分子活性的影响,从而探讨氧化损伤修复的可能性。方法:1.采用酶联免疫吸附实验,定量分析还原剂(硫酸亚铁铵、维生素C、硫代硫酸钠、碘化钾)处理乙肝表面抗体阳性血清后对乙肝表面抗体活性的影响。2.采用Native-PAGE和SDS-PAGE技术,分析还原剂(硫酸亚铁铵、维生素C、硫代硫酸钠、碘化钾)处理血清蛋白后对血清蛋白空间结构和分子结构的影响。3.采用荧光定量PCR技术,定量分析还原剂(硫酸亚铁铵、维生素C、硫代硫酸钠、碘化钾)处理酶和DNA后对酶和DNA的影响。4.采用凝集实验,通过比较凝集效价及凝集强度,定量分析维生素C处理伤寒沙门氏菌后对伤寒沙门氏菌抗原性的影响;采用酶联免疫吸附实验,定量分析维生素C处理乙肝表面抗体后对乙肝表面抗体活性的影响。5.先用氧化剂(过氧化氢)对伤寒杆菌进行氧化损伤处理,再加以还原剂(硫代硫酸钠、碘化钾)作用,采用凝集实验,通过比较实验组和对照组的凝集强度,探讨氧化损伤被修复的可能性;先用氧化剂(高锰酸钾)对乙肝表面抗体进行氧化处理,再加以还原剂(硫代硫酸钠、碘化钾)作用,采用酶联免疫吸附实验,通过比较实验组和对照组的OD值,探讨氧化损伤被修复的可能性;还原剂(硫代硫酸钠、碘化钾)处理90岁老年人乙肝表面抗体阳性的血清,对照组以氯化钠处理血清,酶联免疫吸附试验测抗体活性,探讨还原剂(硫代硫酸钠、碘化钾)对于衰老导致的氧化损伤修复的可能性。结果:1.还原剂对抗体活性的影响实验结果显示:所选择的4种还原剂,碘化钾和硫代硫酸钠处理抗体,其实验组的抑制率和对照组相比没有显著性差异;维生素C和硫酸亚铁铵处理抗体,其实验组的抑制率和对照组相比存在显著性差异。2.还原剂对血清蛋白结构的影响实验结果显示:所选择的4种还原剂,维生素C、碘化钾和硫代硫酸钠处理血清蛋白,与对照组氯化钠处理过的血清蛋白相比,蛋白条带没有变化;硫酸亚铁铵处理的血清蛋白,蛋白条带有模糊或缺失。3.还原剂对酶和DNA影响的实验结果显示:所选择的4种还原剂,维生素C、碘化钾和硫代硫酸钠处理酶和DNA,其实验组的抑制率和对照组相比没有显著性差异;硫酸亚铁铵处理酶和DNA,其实验组的抑制率和对照组相比存在显著性差异。4.维生素C免疫毒理学实验结果显示:维生素C处理伤寒沙门氏菌,在浓度为30 mmol/L时抑制率为96.6%,在浓度为15 mmol/L时抑制率为81.4%,在浓度为7.5 mmol/L时抑制率为37.3%,其半数抑制浓度ID50为9.66 mmol/L;维生素C对乙肝表面抗体的半数抑制浓度ID50为6.63 mmol/L。5.经过氧化氢氧化处理后的伤寒沙门氏菌,再加以还原剂处理,伤寒沙门氏菌与抗血清的凝集强度有所提高;经高锰酸钾氧化处理后的乙肝表面抗体,再加以还原剂处理,乙肝表面抗体的活性有所提高;还原剂(硫代硫酸钠、碘化钾)处理后的90岁老年人乙肝表面抗体阳性的血清与氯化钠处理后相比,乙肝表面抗体的活性没有显著性差异。结论:1.四种还原剂中,硫酸亚铁铵在实验所选浓度范围内对抗体、酶和DNA的活性有抑制作用,对血清蛋白结构有破坏作用;维生素C在实验所选浓度范围内对抗体活性有抑制作用,未见对酶和DNA的活性及血清蛋白结构有影响;碘化钾和硫代硫酸钠在实验所选浓度范围内未见对抗体、酶和DNA的活性及血清蛋白结构有影响。2.维生素C对伤寒沙门氏菌抗原性和乙肝表面抗体的活性有抑制作用。3.碘化钾和硫代硫酸钠对氧化剂(过氧化氢)对伤寒沙门氏菌造成的氧化损伤有一定修复作用;碘化钾和硫代硫酸钠对氧化剂(高锰酸钾)对乙肝表面抗体造成的氧化损伤有一定修复作用;碘化钾和硫代硫酸钠对于衰老导致的长期的氧化应激造成的氧化损伤未见有修复作用。