目的:IgA肾病和膜性肾病是两种最常见的肾小球肾炎。传统的临床检测指标如尿素,肌酐等对两者诊断的敏感性、特异性都不是很高,只有当肾脏发生严重损害时,这些指标才会出现明显的异常。目前临床上主要依靠肾活检来确诊及鉴别诊断IgA肾病和膜性肾病。但是肾活检是一种有创检查,不仅会给患者带来痛苦,更严重的还会引起出血、动静脉瘘等并发症,而且存在许多患者由于病情复杂不能进行肾活检。例如:重度高血压患者,有明显的出血倾向者,孤立肾患者等。代谢组学是通过对生物体内小分子代谢物定性和定量的分析,来揭示生物系统中错综复杂的生物调节机理。代谢产物是各种生理病理过程的最终产物,最能直接反应机体的状态。肾脏病的发生发展与体内的代谢有着密切的联系,本研究的目的是通过代谢组学的方法,采用气相色谱质谱(GC-MS)联用的技术检测IgA肾病和膜性肾病患者的血浆差异性代谢物,揭示这些代谢物与疾病之间的相关性,协助临床在不进行肾活检病理检查的情况下,鉴别诊断IgA肾病和膜性肾病,从代谢组学的角度为鉴别诊断IgA肾病和膜性肾病提供新方法、新思路。方法:1.研究对象及实验分组:本研究选取86名大连医科大学附属第二医院肾内科的患者,根据肾穿刺活检病理结果将其分为两组,第一组42例IgA肾病患者,第二组44例膜性肾病患者。诊断标准参照陈香美主编的临床诊疗指南肾脏病学分册。采集上述受试者的血浆标本。42例IgA肾病和44例膜性肾病患者均经过肾活检穿刺,病理学诊断证实。所有患者均未经激素及免疫抑制剂治疗,同时无其他系统合并症。2.气相色谱质谱联用对其血浆分析:样品经过预冷的甲醇除蛋白,加入十三酸(20 ug/ml)内标,提取代谢物,冻干,冻干样品中加入100μL甲氧胺吡啶复溶,涡旋,超声,37℃水浴120 min。加入MSTFA,37℃水浴硅烷化反应60 min。1,5000 rpm,4℃离心15 min。取上清产物进行气相色谱质谱联用分析。经气相色谱分离后,进行质谱全扫描分析,采集各个时间点出峰的化合物,得到每一个样本的总色谱图。3.生物标志物的筛选和鉴定:得到的谱图经过滤噪、保留时间对齐、色谱峰检测及匹配处理后,通过NIST05,Wiley,Replib和Fiehn谱库检索对代谢物进行定性和定量的分析。然后用主成分分析及偏最小二成判别分析等对其进行统计学分析,找到的VIP>1的变量再做T检验,寻找IgA肾病和膜性肾病患者的血清差异性代谢物,p(双侧显著性检验)<0.05的化合物被定义为差异性化合物。再将有显著性差异的化合物去做LOGISTIC回归分析,然后利用回归曲线去做受试者工作特征曲线(ROC)。此外,对那些鉴定出的差异代谢物还需进一步在HMDB对其结构的功能进一步确认。结果:1.本研究利用气相谱质谱联用的方法分析了IgA肾病、膜性肾病患者血浆代谢轮廓。采用多维统计学方法初步找到了IgA肾病和膜性肾病之间的相关差异性代谢物。2.本研究初步筛查共检测到110个化合物,经过统计学分析,最终发现18种差异性代谢物可以用来鉴别诊断IgA肾病和膜性肾病,其中氨基酸有9种,分别是:正亮氨酸,丙氨酸,丝氨酸,谷氨酸,天冬氨酸,半胱氨酸,焦谷氨酸,高丝氨酸,甘氨酸。其余是:乙醇胺,氨基甲酸,1,2-丙二醇,1,5-戊二醇,肉桂腈,1-甲基磷酸,草酸、酮异己酸、琥珀酸。3.肉桂腈和1-甲基磷酸是IgA肾病的保护因素,酮异己酸和琥珀酸是IgA肾病的危险因素。而对于膜性肾病患者则是恰恰相反。结论:代谢组学方法可以为IgA肾病和膜性肾病提供新的生物标志物,对其鉴别诊断提供了新的方法。