大麦类型丰富,分布遍及世界,是典型的自花授粉作物,经过诱变后性状易发生改变,在科学研究中是一种理想的实验作物。本研究课题以二棱大麦山农457、六棱大麦山农335为实验材料,在含有反义磷脂酶Dγ基因(PLDγ)的根癌农杆菌介导下,以自然状态下生长的大麦幼穗作受体进行转基因实验。在卡那霉素筛选的基础上,进行了PCR扩增、PCR-Southern杂交检测,结果证明反义PLDγ基因已整合进了受体基因组。同时,本研究对转基因株系与对照在耐盐性、抗旱性及主要农艺性状上的差异进行研究,主要结果如下:1.用改良的根癌农杆菌介导法将反义磷脂酶Dγ基因导入实验材料中,在田间表现型筛选的基础上,经过严格的Km筛选,得到了Km抗性苗。对Km抗性苗进行特异PCR及PCR-Southern杂交鉴定,证实目的基因已整合到大麦基因组中,获得了转基因大麦株系。2.对分子检测呈阳性的转基因株系进行耐盐性实验鉴定,培养基上实验结果表明,转基因株系耐盐能力强于对照,六棱转基因株系能够在含1.4%NaCl的MS培养基中发芽,二棱转基因株系能够在含1.6%NaCl的MS培养基中发芽;盆钵实验结果显示在用1.0%NaCl处理20天后,二棱CK受到明显抑制,幼苗萎蔫,叶色黄化严重,长势缓慢,存活率仅为53.1%,而转基因株系039043与039045生长正常,基本无黄化现象,前者存活率为73.4%,后者为68.5%,经LSD检验差异均达显著水平。3.对筛选出的转化株系进行抗旱性鉴定,转基因株系能在600mMol/L甘露醇培养基中生长,对照此时不能发芽,显示转基因株系抗旱性强于对照。对苗高、根数及根长的LSD分析结果表明,转基因株系在这些方面确实有所改善。4.转基因株系和对照的质膜透性测定显示:在相同胁迫条件下转化株系电导率的变化幅度显著小于对照变化幅度,表明转化株系离子渗漏相对较轻,质膜受损程度较小,对外界逆境的反应不如对照敏感,一定程度上表明转反义PLDγ基因有望提高大麦的耐盐性与抗旱性。5.对分子检测呈阳性的转基因株系进行大田种植并观察农艺性状,变异株系与对照相比,在生育期﹑株高﹑穗粒重﹑旗叶面积﹑穗下节长等