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间斑寇蛛(LatrodectustredecimguttatusRossi,1790)隶属于球蛛科的一种中型蜘蛛,又称黑寡妇蜘蛛,是目前世界上所知毒性最强的蜘蛛之一。
本研究成功地对间斑寇蛛进行了室内人工饲养,并对间斑寇蛛的形态特征、生活习性与生态行为等进行了观察和分析,同时研究和探讨了温度、湿度和食物对间斑寇蛛活动能力、成活率和生殖力的影响。
经统计分析,雌蛛平均体长10.037mm,体重0.475g;雄蛛平均体长4.58mm,体重0.104g。一头雌蛛平均可产卵袋4个,每个卵袋可孵出幼蛛200-300头。雌、雄幼蛛分别蜕皮6-7次和4次后变为成蛛。成蛛大多在入冬前死去。雄蛛寿命98-144天,雌蛛寿命130-300天。雌蛛与迟孵化约30天左右的雄蛛配对时,产卵率高于与同批孵化的雄蛛配对。间斑寇蛛幼蛛度过适当长度的“卵袋期”对于以后的成活与正常发育是必要的。在影响间斑寇蛛室内饲养效果的多种因素中,相对湿度是最重要的。间斑寇蛛生长发育的最适合温度为25℃,相对湿度为65﹪。
通过对电刺激和分离毒囊等几种采毒方法的比较,发现电刺激是最佳的采毒方法。用反相高效液相色谱、质谱、双向电泳等方法对电刺激和分离毒囊得到的粗毒的的组成进行了比较研究。
电刺激粗毒和分离毒囊得到的粗毒对小鼠腹腔注射的LD5。值分别为为0.393mg/kg和0.164mg/kg。通过电生理实验发现该粗毒能阻断小鼠离体膈神经膈肌的神经肌肉传递。当加入6μg/ml毒囊取得的粗毒,完全阻断时间为25.0±2.2min;而加入3.2μg/ml电刺激取的粗毒,完全阻断时间为23.3±2.2min,说明电刺激粗毒的生物学活性要高于分离毒囊得到的粗毒的生物学活性。
对分离毒囊得到的粗毒采用双向凝胶电泳进行了分离,对凝胶图象分析发现该粗毒中分子量10KD-90KD的酸性蛋白含量丰富,而碱性蛋白含量和分子量10KD以下的小分子量蛋白含量较少。从图象上可以识别出500个左右的蛋白质点,对其中80个蛋白质点用胰蛋白酶进行了胶内酶解,并进行了质谱分析和数据库搜索。共鉴定了77个蛋白质,并对其中部分蛋白质的功能进行了探讨。