【摘 要】
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角鲨烯型三萜除了具有抗癌、抗氧化等重要生物活性,还在药物递送、皮肤护理等领域有着广泛应用。因此,它们的高效生物合成具有重要意义。本研究发现在酿酒酵母中过表达灵芝来
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角鲨烯型三萜除了具有抗癌、抗氧化等重要生物活性,还在药物递送、皮肤护理等领域有着广泛应用。因此,它们的高效生物合成具有重要意义。本研究发现在酿酒酵母中过表达灵芝来源的细胞色素P450基因cyp505d13和对照质粒相比,重组酵母的发酵提取物在UPLC上能产生多个新峰。通过对工程菌株的大规模发酵、产物提取、硅胶柱层析、半制备分离和核磁共振分析,我们鉴定了其中三个主要化合物的结构。它们分别是两个新发现的角鲨烯型三萜4,8-二羟基-22,23-氧化角鲨烯(4,8-dihydroxy-22,23-oxidosqualene,ST-1)、8-羟基-2,3;22,23-双环氧角鲨烯(8-hydroxy-2,3;22,23-squalene dioxide,ST-2)和一个已知的角鲨烯型三萜2,3;22,23-双环氧角鲨烯(2,3;22,23-squalene dioxide,ST-3)。经发酵培养基优化,重组酵母在培养基中含有2%(wt/vol)葡萄糖和2%(wt/vol)甘油,发酵96小时的条件下,ST-1、ST-2和ST-3的产量分别是3.54 mg/L,31.65 mg/L和38.21 mg/L。此外,体外酶反应暗示CYP505D13可能参与ST-3的产生。本研究为ST-1、ST-2和ST-3的高效生物合成及其应用奠定了基础,也为角鲨烯型三萜化合物及其关键元件的发现提供了借鉴。
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