【摘 要】
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假丝酵母(candida sp.)脂肪酶粗酶液,经硫酸铵沉淀,DEAE-纤维素离子交换层析,SephadexG-100凝胶过滤,得到SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的脂肪酶,纯化倍数为4.1倍,分子量为40kD.
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假丝酵母(candida sp.)脂肪酶粗酶液,经硫酸铵沉淀,DEAE-纤维素离子交换层析,SephadexG-100凝胶过滤,得到SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的脂肪酶,纯化倍数为4.1倍,分子量为40kD.研究了纯化酶的一般性质和选择催化特性.该脂肪酶在以对硝基苯酚月桂酸酯(p-Nitrophenyl Laurate,p-NPL)为底物时,pH稳定性范围在5.0-9.0,最适pH为7.0;在30℃以下比较稳定,最适温度为30℃;在37℃下以p-NPL为底物的Km值为2.86×10<-4>μmol/L;可被Ca<2+>,Mg<2+>激活;含糖量约为6﹪;等电点接近5.0;N端氨基酸序列为VYTST ETSHI DQESY NF-EK YARL.得到的电泳纯的脂肪酶,既有水解活力,又能催化脂肪酸和醇合成相应的酯,是一种多功能的酶.该脂肪酶具有区域和立体选择性催化功能,在1,3位水解鱼油中的甘油三酸脂,可以使二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic Acid,DHA)和二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic Acid,EPA)富集;在无溶剂体系中,以月桂酸为酰基供体,海藻糖为酰基受体,用吸附到硅藻土上的假丝酵母脂肪酶作催化剂,选择性酯化合成了6,6-海藻糖月桂酸酯.
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