转染ADAM17-shRNA的BMSC对MCF-7人乳腺癌细胞的影响

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目的观察转染ADAM17-shRNA的大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrowmesenchymal stem cell, BMSC)与MCF-7乳腺癌细胞混合培养后,对MCF-7增殖能力以及侵袭能力的影响。旨在探究新的ADAM17-shRNA给予方式,为以ADAM17为靶点的乳腺癌靶向治疗提供新的方法。方法设计4个针对ADAM17以重组慢病毒为载体的shRNA,将其分别转染入MCF-7人乳腺癌细胞中,通过real-time PCR检测mRNA,筛选出对ADAM17表达的干扰率最佳的shRNA。体外培养SD大鼠的BMSC,用筛选出的shRNA转染BMSC细胞,将转染后的BMSC与MCF-7细胞共培养,用real-time PCR方法检测共培养后ADAM17mRNA的表达,用transwell侵袭实验检测MCF-7的侵袭能力,用MTT法检测MCF-7的增殖能力。结果Realtime PCR方法筛选出的shRNA-has-1658可显著抑制MCF-7细胞ADAM17mRNA的表达。Realtime PCR检测共培养后ADAM17mRNA的表达,将对照组的ADAM17mRNA相对表达水平设为100%,转染组的ADAM17mRNA的水平明显低于对照组,转染组与对照组比较,差异有统计学意义。体外侵袭实验显示对照组和无意义序列组MCF-7细胞到达下室的细胞数量明显多于转染组,转染组与对照组比较,差异具有统计学意义。MTT实验显示,转染组和对照组相比,转染组细胞增殖能力明显受到抑制,差异有统计学意义。结论转染ADAM17-shRNA的BMSC对MCF-7的ADAM17mRNA表达有显著抑制作用,对MCF-7的侵袭和增殖能力也有明显的抑制作用,提示以BMSC为载体的ADAM17-shRNA可用于乳腺癌的靶向治疗。
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