反胶团复性法是目前国内外最为新颖的蛋白质复性方法之一,可见报道有限,其中除一篇使用的是非离子型反胶团外,其余几篇使用的都是离子型反胶团,且均未修饰亲和配基.本文利用新型的反胶团一色素亲和反胶团辅助溶菌酶复性,色素亲和反胶团是一种修饰了亲和配基的非离子型反胶团,是由亲和配基一活性色素辛巴蓝(CB)、非离子型表面活性剂一失水山梨醇三油酸酯(Span 85)、有机溶剂正己烷(n-hexane)等在一定条件下反应得到的. 本文系统研究了CB/Span 85/n-hexane系统辅助溶菌酶复性的实验方法以及操作参数的影响,包括Span 85、CB、脲、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、还原型谷胱甘肽(GSH)、溶菌酶的浓度,pH值,反胶团含水率(Wo),反应时间等.成功实现了较高浓度(3～3.5 mg/mL)溶菌酶的完全复性,体现出反胶团法较直接稀释法的巨大优势,以及非离子型亲和反胶团较单纯非离子型反胶团在复性效果方面的较大优势；同时保证95﹪以上的溶菌酶能够被0.5 mol/LMgCl<,2>溶液反萃回收,且圆二色光谱分析证明了最终所得溶菌酶二级结构的正确性,体现出非离子型亲和反胶团较离子型反胶团在蛋白质回收方面的较大优势.在此基础上,尝试改进反胶团性能,如添加助溶剂、助表面活性剂等以期进一步提高复性浓度,取得了一定的效果. 在成功实现CB/Span 85/n-hexane系统辅助溶菌酶复性基础上,本文进一步将色素亲和反胶团与人工伴侣,即阳离子型表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)与β-环糊精(β-CD)的联合作用系统,耦合辅助溶菌酶复性.系统研究了二者耦合作用辅助溶菌酶复性的实验方法以及操作参数的影响,包括脲、GSSG、GSH、溶菌酶、CTAB、β-CD的浓度,W<,0>等.耦合复性法在很多方面起到了优化作用,并使得4 mg/mL溶菌酶被完全复性.本文在此基础上还尝试了使用其它方法与色素亲和反胶团耦合辅助溶菌酶复性,如醇类小分子添加剂等,也取得了一定成效.