【摘 要】
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1997年3ˉ4有份,从江苏镇江、南京江宁、安徽来安和江苏省农科院采集具有典型梭条花叶症状的小麦病叶,小麦品种均为扬麦158.病叶经四氯化碳(CCl)澄清,聚乙二醇(PEG-6000)沉淀
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1997年3ˉ4有份,从江苏镇江、南京江宁、安徽来安和江苏省农科院采集具有典型梭条花叶症状的小麦病叶,小麦品种均为扬麦158.病叶经四氯化碳(CCl<,4>)澄清,聚乙二醇(PEG-6000)沉淀粗提纯后,再经30%蔗糖垫超速离心得到精提纯病毒样品.电镜观测表明所提纯病毒粒体为线形,大小为100ˉ1800×12ˉ13nm,长度具有两个分布高峰,分别为200ˉ300nm和500ˉ600nm.病毒经紫外扫描,其只收光谱呈典型的核蛋白吸收曲线,A<,260>/A<,280>为1.24.SDS-PAGE结果表明,四个地点样品的病毒外壳蛋白亚基均为一个组分,分子量约为36.5kD.根据样品症状,提纯病毒的电镜观测、紫外吸收特性及外壳蛋白亚基分子量测定等结果,研究人员推断所采集的四个样品均为小麦梭条花叶病毒(WSSMV),但它们外壳旧白的稳定性存在明显差异,其稳定性大小依次为:江苏镇江〉南京江宁〉安徽来安〉江苏省农科院.病毒RNA经1.2%琼脂糖凝胶电泳检测分析证实,WSSMV核酸有两个组分,即RNA-1和RNA-2,并且四个样品RNA分子量的大小无明显差异;以1.0%低熔点琼脂糖凝胶分别纯化RNA-1和RNA-2.设计一对引物,以南京江宁样品纯化RNA-1为模板,经RT-PCR扩增出包含CP基因在内的1.7Kb大小的目的片段为进一步的WSSMV分子生物学研究打下基础.
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