H5亚型AIV疫苗免疫抗体监测及鸭源H5N1亚型AIV HA、NA基因分析

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禽流感(Avian Influenza,AI)是由A型流感病毒引起的一种禽类(家禽和野禽)的传染性疾病综合征。根据病毒致病性不同可以分为高致病性禽流感病毒(highly pathogenic avian influenza virus,HPAIV)、低致病性禽流感病毒(lowlypathogenic avian influenza virus,LPAIV)与无致病性禽流感病毒(mildly pathogenicavian influenza virus,MPAIV)。HPAI对养禽业可造成毁灭性打击,被世界动物卫生组织(World Organization forAnimal Health,OIE)列为A类疾病,我国将其列为一类动物疫病。 目前的研究证实,HPAIV不仅感染禽类,还可以感染大多数的温血动物,自1997年香港发生人感染禽流感以来,陆续有报道温血动物感染禽流感的事件,禽流感已经不单是禽类的一种疾病,且已具有重要的公共卫生学意义,目前,我国对禽群H5亚型禽流感的防控是采用疫苗免疫,加强禽流感疫苗免疫后抗体的监测也就具有重要意义。 本研究通过对本地区广泛饲养的不同种类家禽(江西鸡、乌洲鸡、三黄鸡、白鸭、马岗鹅等)免疫不同生产厂家的H5亚型禽流感灭活油乳剂疫苗的HI抗体进行监测,监测结果表明:1、哈尔滨维科生物技术开发公司生产的基因工程重组疫苗H5N1Re-1株和肇庆大华农生物药品有限公司生产的H5N2株灭活油乳剂疫苗对江西鸡免疫效果较好;2、、哈尔滨维科生物技术开发公司生产的基因工程重组疫苗H5N1 Re-1株对白鸭的免疫效果较好;3、、哈尔滨维科生物技术开发公司生产的基因工程重组疫苗H5N1 Re-1株对马岗鹅的免疫效果较好;4、在检测鸭群、鹅群的H5亚型禽流感免疫抗体时,分别利用公白鸭、公鹅的1%红细胞悬液比利用公鸡的1%红细胞悬液进行检测,结果准确; 5、禽流感-新城疫重组二联活疫苗免疫鸡群后,经HI监测,抗体水平基本为0;6.鸭免疫疫苗后,进行攻毒保护性实验,结果表明,疫苗免疫后可有效减少H5亚型禽流感病毒的排毒。 本实验同时对鸭源H5N1亚型AIV番禺分离株HA、NA基因进行克隆及序列分析。结果表明:HA基因ORF全长为1704bp,编码568个氨基酸;HA蛋白裂解位点处氨基酸序列为-R-R-R-K-R-,符合高致病性禽流病毒的分子特征, HA基因与A/duck/Guangxi/793/2005(H5N1)的核苷酸相似性最高,为98.2%;NA基因ORF全长为1350bp,编码449个氨基酸,NA基因与A/chicken/HongKong/282/2006(H5N1)的核苷酸相似性最高,达98.5%,翻译后的氨基酸相似性为99.1%,有5个位点发生了变化,分别为:16V/I,107L/M,127L/M,143I/V,366D/E。
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