Foxp3属于FOX（forkhead box）转录因子家族，对调节性T细胞（regulatory T cells Treg）的发生及生物学功能的发挥具有十分重要的作用。研究发现表达外源性Foxp3可使非调节性T细胞获得调节性T细胞的表型及功能。蛋白转导结构域（protein transduction domain,PID）是HIV-1（human immunodeficiency virus type 1）基因编码的反式激活蛋白（Trans-activator transcription，TAT）中的一段具有穿膜功能的多肽，能够携带外源性蛋白穿过几乎所有的真核细胞膜进入细胞浆和核内。目的：构建带HIV-1 PTD序列的原核表达载体pET28a-PID，表达小鼠PTD-Foxp3融合蛋白，并研究其对T细胞免疫功能的调节作用。方法：利用基因重组技术构建pET28a-PTD原核表达载体及pET28a-PID-Foxp3融合蛋白表达载体，并在大肠埃希菌Rosetta（DE3）中表达融合蛋白，经Ni²⁺分离柱纯化带His标签的PID-Foxp3融合蛋白。采用Western-blot技术鉴定所表达的PTD-Foxp3蛋白；运用流式细胞术确认融合蛋白穿膜功能；通过混合淋巴细胞反应初步分析融合蛋白对T细胞活化增殖能力的调节。结果：成功地构建了pET28a-PID-Foxp3融合蛋白表达载体，表达并纯化了PTD-Foxp3融合蛋白。通过流式细胞术分析证实PTD-Foxp3融合蛋白能有效的进入细胞内；而且能在混合淋巴细胞反应中有效抑制T细胞的活化增殖能力。结论：成功表达具有生物学活性的PTD-Foxp3融合蛋白，为进一步研究PTD-Foxp3融合蛋白生物学功能和构建表达人PTD-Foxp3融合蛋白奠定了基础。