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本实验是从199培养基和DMEM培养基入手,研究能提高狂犬病毒增殖量的一种或一组氨基酸成分。通过对比199培养基与DMEM培养基配方,发现有六种浓度差异较大的氨基酸成分。首先将199培养基作为基础培养基,分别添加六种氨基酸的2种浓度水平,配制成12种维持液培养狂犬病毒,发现增加这六种氨基酸对提高狂犬病毒的增殖量有不同程度的影响。然后运用正交试验的方法,初步筛选出四种对提高狂犬病毒滴度作用较大的氨基酸成分。为验证对多个变量进行的有效筛选,我们继续采用正交试验法,对影响作用较大的氨基酸的不同浓度范围进一步考察,验证和细化初步筛选的结果,确定一组氨基酸成分。
在使用小方瓶筛选阶段,发现某些氨基酸对提高狂犬病毒的增殖量有一定的作用,新配方培养基培养的狂犬病毒的病毒滴度比基础199培养基提高10倍左右,但筛选出的氨基酸的浓度有一定的范围区间。在生物反应器上验证,证实筛选出的培养基配方适合于高密度培养狂犬病毒,能提高狂犬病毒滴度十倍左右。