益心酮系山楂叶提取物总黄酮,是一种作用广泛、不良反应较少的的天然药物。祖国医学认为其具有活血化瘀、理气舒络、宣通血脉等功效,尤其适用于心脑血管疾病的治疗。现代药理学和临床研究表明,益心酮具有降血压、扩管强心、抗心肌缺血等作用。该药物的普通片剂——益心酮片收载于2010年版《中国药典》一部。该药目前在临床上主要用于治疗冠心病心绞痛、高血脂症、脑动脉供血不足等疾病,临床疗效确切。其作用机制可归纳为:①改善微循环,扩张冠状动脉,增加冠脉灌注和心肌血液供应,因而改善心肌缺血缺氧,减轻心肌缺血的损伤和减少缺血的范围;②降低血液黏度,加快血液流速,促进侧支循环的建立,改善心肌缺血、缺氧状态,增加冠脉血流量及心肌供氧;③降低血清血脂含量,防止脂质在动脉管壁及细胞内的沉积,阻断冠状动脉粥样硬化及血栓形成的环节,防止冠心病心绞痛的发生和发展;④降低纤维蛋白原浓度,抑制血小板黏附,清除自由基,促进纤溶活性。另外,山楂叶提取物总黄酮还具有抗炎镇痛、降血糖、抗氧化防衰老等作用。因此,对某些疾病的治疗和预防具有积极的作用。.目前国内外已经上市的益心酮制剂主要包括:片剂、胶囊剂、分散片及滴丸,虽然其临床疗效确切,但其一日均需多次大量服药,患者服用这些药物时依从性较差,且大剂量给药极有可能导致血药浓度波动较大,从而易产生一系列的毒副作用,进而使药效发挥不稳定,影响临床正常使用。双层渗透泵给药系统是由含药层、助推层和半透膜包衣层组成的固体控释制剂,它能够使药物的释药曲线呈零级释药特征,与其他剂型相比具有如下优势:①在体内能在一定时间内以恒速释药,且不受介质环境、胃肠道蠕动等体内生理因素的影响;②由于其恒速释药,最大限度地避免了一次大量服药造成的血药浓度波动(即“峰谷”现象),降低了药物的毒副作用;③减少了给药次数,能显著提高病人的顺应性及制剂的有效性和安全性;④渗透泵制剂运用到的薄膜包衣技术能掩盖某些药物的不良气味,一定程度上提高患者的顺应性;⑤渗透泵制剂技术含量高,开发周期短,易于产业化。因此,本文以益心酮为模型药物,采用双层渗透泵技术制备一种一日给药两次,每次仅需服用一片的益心酮双层渗透泵控释片,以期望获得一种具有稳定的血药浓度,并能减少给药次数,从而降低传统剂型每日多次大量给药所造成的“峰谷”现象、提高用药的安全性和病人的顺应性的理想制剂。本文主要研究了益心酮双层渗透泵控释片的制备工艺,设计并优化了其片剂的处方;进行了益心酮双层渗透泵控释片的质量控制方法及其制剂稳定性的研究。一、益心酮双层渗透泵控释片的质量控制研究为控制益心酮控释片的质量,本文根据其制剂特点,分别采用高效液相色谱法和紫外-可见分光光度法,建立了以益心酮主要有效成分金丝桃苷为测定指标的益心酮双层渗透泵控释片的含量测定和释放度测定的方法。其中含量测定的色谱条件为:色谱柱:Yilite C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相:四氢呋喃-甲醇-乙腈-0.5%醋酸溶液(19.4:1:1:78.6),检测波长:363nm;流速:1.0 ml·min-1;柱温:30℃。结果显示,在上述色谱条件下金丝桃苷的浓度在2-8.4μg.ml-1之间线性良好,r=0.9999,平均加样回收率为101.0%,RSD为0.95%(n=6)。说明所建立的高效液相色谱含量测定方法专属性好、快速灵敏、结果准确可靠,可用于益心酮双层渗透泵片的含量测定。释放度实验依照《中国药典》2010年版二部附录X C溶出度测定法第三法装置,以脱气蒸馏水100 ml为释放介质,转速100 rpm,介质温度(37.0±0.5)℃,分别在2、4、6、8、10、12小时取液5ml,同时补充等体积同温释放介质,0.45μm微孔滤膜过滤后,续滤液稀释5倍作为供试溶液,于363nm波长处测定指标物质金丝桃苷的吸光度。结果表明金丝桃苷的浓度在0.2μg/ml-7.2μg/ml之间线性良好,r=0.9999,平均回收率为99.26%,RSD=1.460%(n=5)。说明所建立的测定益心酮双层渗透泵控释片体外释放度的紫外-可见分光光度法专属性良好、快速灵敏、结果准确可靠,可用于益心酮双层渗透泵片的释放度测定。本研究建立的含量测定和释放度测定的方法能准确、灵敏的测定益心酮双层渗透泵控释片的药物含量和释放度,为其质量控制标准的建立提供了依据。二、益心酮双层渗透泵控释片的制备工艺研究本研究选用氯化钠和高分子材料聚氧乙烯(PEO)分别作为片芯的渗透压活性物质和助推材料,以醋酸纤维素(CA)和聚乙二醇4000(PEG4000)为包衣材料,以丙酮为有机包衣溶媒制备益心酮双层渗透泵控释片。根据渗透泵制剂的释药机理,采用FDA推荐的f2相似因子法作为体外累积释放度的评价指标,根据双层渗透泵片的释药机理,主要对含药层处方、助推层处方、包衣膜处方、控释片制备工艺以及体外释药条件这五个方面进行全面考察。通过单因素考察试验,确定了对益心酮双层渗透泵控释片体外累积释放度(R1)和释药曲线线性拟合度(R2)影响最大的三个因素为:助推层聚氧乙烯的含量(因素A)、助推层氯化钠的含量(因素B)、包衣膜增重(因素C)。将以上述三因素作为自变量,以12小时体外累积释放度(R1)和释药曲线线性拟合度(R2)为因变量,采用Box-Behnken设计-效应面法(BBD-RSM),对益心酮双层渗透泵控释片的处方进行三因素三水平优化实验,得到优化处方,并按照最优处方进行验证,比较实测值和软件预测值的差异,从而检验该模型的预测效果。实验结果表明,预测值与实际优化处方的测得值基本一致,偏差较小,说明Box-Behnken设计-效应面法在制剂处方优化中具有较高的准确性,可被推广使用。所筛选的最优处方及制备工艺为:1)含药层:主药:128mg、氯化钠:8mg;2)助推层:聚氧乙烯WSR303:128mg、氯化钠:20mg;3)包衣增重:为片芯重量的10%;4)压片工艺为片芯直径9mm、硬度7-8kg、片重286mg;5)包衣工艺为包衣锅直径:10cm、片床温度:50℃、垂直倾角:35℃、包衣液输入速度:3 ml·min-1、压力0.4-0.6KPa、转速:28r·min-1。所制得的益心酮双层控释片释药行为符合零级释药特征(r=0.9931),达到控释要求。三、益心酮双层渗透泵控释片的稳定性研究根据《中国药典》药物稳定性指导原则及益心酮双层渗透泵控释片的质量标准,本文对益心酮控释片进行了初步的稳定性考察,分别包括影响因素试验、加速试验以及长期试验。1)影响因素试验:影响因素试验包括为期10天的高温(60℃)试验、高湿(RH=92.5%)试验以及强光照射试验(4500xl),分别在0、5、10天取样对其外观性状、主药含量、12小时累积释放度进行考察,结果表明:检测指标均稳定,而在相对湿度为92.5%条件下10天吸湿严重,有药物从释药小孔流出,因此本品应在干燥、密闭的环境下保存。2)加速试验:加速试验是在40℃、相对湿度为75%条件下进行,对模拟上市包装的三批样品进行为期6个月的加速试验,分别在0、1、2、3、6个月取样对其外观性状、主药含量、12小时累积释放度进行考察。结果表明:在6个月的加速试验中,益心酮双层渗透泵控释片各项检测指标均未见明显变化,说明本品在市售益心酮双层渗透泵控释片在60℃条件下10天和4500xl光照条件下10天,各项包装条件下具有较好的稳定性。3)长期试验:长期试验是在25℃、相对湿度为60%的条件下,对模拟上市包装的三批样品进行为期6个月的考察,结果表明在为期6个月的长期试验中,益心酮双层渗透泵控释片的各项评价指标均稳定,未见明显变化,表明本品在市售包装条件下具有良好的稳定性,有效期可暂定为6个月。由此可见,益心酮双层渗透泵控释片对高湿环境较敏感,在其他条件下较稳定,因此其应在干燥条件下保存。