背景与目的:“两次打击”学说认为,白血病的发生常常累及两大类以上基因的突变。第一类基因突变的结果往往引起酪氨酸激酶的持续活化,从而赋予细胞增殖和生存的优势,这类基因主要包括FLT3、C-kit以及BCR/ABL融合基因等。第二类基因突变的结果常常导致细胞分化的受阻,这类基因包括C/EBPα、PML/PARα、AML1/ET0融合基因等。显然,受累基因的不同赋予白血病细胞不同的生物学特征,而在临床上可能呈现不同的临床表现和症状以及对治疗的不同反应。目前,对急性白血病患者FLT3基因的突变以及PML/PARα融合基因在人类急性早幼粒细胞白血病(APL)的作用进行了大量深入的研究。但是,有关APL患者中FLT3基因突变,PML/PARα融合基因mRNA表达阳性并伴有FLT3基因突变患者的临床表现、症状、以及疗效仍然缺乏全面详细的研究。为此,本研究系统分析了APL患者FLT3基因突变、FLT3基因mRNA表达、PML/PARα融合基因mRNA表达及其与患者临床表现、疗效的关系和意义。方法:收集自2007年4月～2008年3月就诊湘雅医院血液科的APL患者骨髓标本,提取白细胞(WBC)基因组DNA和细胞总RNA后,分别采用聚合酶链式反应(PCR)、逆转录(RT)PCR和DNA酶切以及巢式RT-PCR技术分析FLT3基因内部串连重复(ITD)突变,FLT3基因D835点突变,FLT3基因mRNA表达以及PML/PARα融合基因mRNA表达。在此基础上,进一步分析FLT3突变型APL患者以及PML/RARα融合基因mRNA表达阳性并伴有FLT3基因突变的APL患者的临床表现、症状、疗效及其关系。结果:34例APL患者中,4例患者可检测到FLT3/ITD突变,约为被检测患者的11.8%,4例患者可检测到FLT3 D835点突变,约占被检测患者的11.8%。其中,有两例患者既存在FLT3/ITD突变,又存在FLT3 D835点突变。另外,30例患者可检测到FLT3基因mRNA表达,阳性率为88.3%,22例患者可检测到PML/RARα融合基因mRNA表达,阳性率为64.7%,包括15例表达长型(L型),7例表达短型(S型)PML/PARα融合基因的患者。在4例FLT3/ITD突变的APL患者中,均表达PML/PARα融合基因,即3例患者表达S型,1例患者表达L型,而在另4例FLT3 D835点突变的患者中,1例患者表达L型,2例患者表达S型,另一例患者既未检测到L型又未能检测到S型PML/RARα融合基因的表达。统计分析结果显示,FLT3/ITD突变型患者中高外周血WBC数(WBC≥10×10~9/L)患者的阳性率明显多于FLT3/ITD野生型患者,其差别具有显著意义(P＜0.05)。在FLT3突变并伴有PML/PARα融合基因表达的患者中高外周血WBC数患者的阳性率显著多于仅表达PML/RARα融合基因患者中的阳性率,其差别具有统计学意义(P＜0.05)。但是,在FLT3/ITD突变型以及FLT3/ITD突变并伴有PML/PARα融合基因表达的患者中,骨髓原始细胞与早幼粒细胞两者之和高含量(骨髓原始细胞与早幼粒细胞两者之和≥80%)患者的阳性率、具有B级出血症状患者的阳性率、完全缓解患者的阳性率与FLT3/ITD野生型或仅表达PML/RARα融合基因患者中的阳性率差异无统计学意义(P＞0.05)。同时,在FLT3 D835点突变患者中,高外周血WBC数患者的阳性率、骨髓原始细胞与早幼粒细胞两者之和高含量患者的阳性率、具有B级出血症状患者的阳性率、完全缓解患者的阳性率与FLT3D835野生型患者中阳性率的差异无统计学意义(P＞0.05)。结论:在APL患者中存在较高的FLT3突变,FLT3/ITD和D835突变发生率基本相同,两种突变既可单独存在也可同时存在于APL患者;在APL患者中,大部分可检测到FLT3 mRNA表达;大部分FLT3/ITD突变型以及FLT3突变并伴有PML/RARα融合基因表达的APL患者常表现高外周血WBC数,但其骨髓原始细胞与早幼粒细胞两者之和的含量,出血症状以及完全缓解率与FLT3/ITD野生型或仅表达PML/PARα融合基因的患者无显著差异;FLT3 D835点突变APL患者的外周血WBC计数、骨髓原始细胞与早幼粒细胞两者之和的含量、出血症状以及完全缓解率与FLT3 D835野生型患者无统计学差异。