TOCP诱发OPIDN后成年母鸡大脑和脊髓组织中细胞骨架蛋白的改变

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目的 通过建立成年罗曼母鸡有机磷化合物引起的迟发性神经毒性(organophosphorus easter-induced delayed neurotoxicity, OPIDN)中毒模型,测定三邻甲苯基磷酸酯(tri-ortho-cresyl phosphate, TOCP)染毒前后鸡大脑和脊髓组织中高分子量神经丝蛋白(high molecular weight neurofilament, NF-H)、中分子量神经丝蛋白(medium molecular weight neurofilament, NF-M)、低分子量神经丝蛋白(light molecular weight neurofilament, NF-L)、以及α-微管蛋白(α-tubulin)、β-微管蛋白(β-tubulin)、微管相关蛋白2(microtubulin-associated protein 2, MAP-2)、微丝蛋白β-actin,这7种细胞骨架蛋白相对含量的变化,阐明在TOCP诱发的OPIDN发生过程中细胞骨架蛋白的改变,为探讨有机磷化合物引起的迟发性神经毒性的发病机制提供依据。 方法 1.动物模型 成年罗曼母鸡随机分为三组:对照维、375 mg·kg-1组和750mg·kg-1组,每组6只。TOCP溶解于玉米油中,按0.65 ml·kg-1一次性经灌胃给予动物,对照组给予同体积的玉米油。 2.体重和OPIDN临床症状观察 密切观察各组动物的一般状况变化,定期测量体重,每天密切观察受试母鸡的OPIDN临床症状,按8级评价神经毒性。 3.SDS-PAGE和Western Blot分别取出各受试母鸡的大脑和脊髓组织,匀浆,离心,用SDS-PAGE和Western Blot方法分别分析大脑和脊髓组织沉淀和上清中NF-H、NF-M、NF-L以及α-tubulin、β-tubulin、β-actin、MAP-2的相对含量变化。 结果 1.体重和OPIDN临床症状观察 随着实验的进行,给药组动物的体重和
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