论文部分内容阅读
目的：检测microRNA合成关键酶Dicer基因沉默对卵巢癌生物学特性的影响并考察卵巢癌细胞Dicer基因表达是否受组蛋白甲基转移酶EZH2调控。方法：应用实时定量PCR法和免疫印记法检测Dicer基因在卵巢癌耐药株和敏感株表达的差异,应用靶向Dicer基因的siRNA抑制卵巢癌细胞中Dicer基因的表达,并且用MTT法和Brud实验检测细胞的增殖,应用流式细胞仪进行细胞周期检测,Transwell小室实验检测细胞的迁移,MTT法检测细胞的耐药性；获得EZH2基因稳定沉默的卵巢癌细胞株,应用实时定量PCR法和免疫印记法检测EZH2基因沉默后Dicer基因表达的变化。结果：靶向Dicer基因的siRNA成功抑制卵巢癌细胞中Dicer基因的表达；Dicer基因的沉默能够明显促进卵巢癌细胞的增殖能力,提高卵巢癌细胞的迁移能力,并且促进卵巢癌细胞周期的进程；和敏感株相比,Dicer基因在卵巢癌耐药株中低表达,抑制卵巢癌细胞Dicer基因的表达能够增加其对铂类药物的耐药性；卵巢癌细胞中EZH2基因的沉默可以上调Dicerl的表达。结论：Dicer基因可能通过抑制成熟miRNA的生成在卵巢癌的进展过程中发挥抑癌基因的作用,Dicer基因是一个潜在的卵巢癌治疗靶点。