内生芽孢杆菌B014热稳定蛋白组分抗水稻黄单胞菌病害研究

来源 :华南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nbwdwby
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
黄单胞菌(Xanthomonas spp.)是一类最为重要的植物病原细菌,开展植物黄单胞菌病害生物防治研究对于减少化学农药带来的环境毒害、促进农业可持续发展具有重要意义。本论文以水稻稻黄单胞菌(X.oryzaepv.oryzicola, Xoo)病害为主要防控对象,以本实验室前期得到的一株具有广谱抗菌活性的内生解淀粉芽孢杆菌菌株B014为生防资源,在获得该生防菌胞外抗稻黄单胞菌蛋白基础上,开展该抗菌蛋白的体外、体内抗水稻黄单胞菌病害研究。其研究内容与主要结果如下:  1.抗稻黄单胞菌热稳定蛋白的制备及其抗细菌谱测定:以对稻黄单胞菌XooX102生长抑制为活性引导,通过酸沉淀、醇抽提、煮沸去杂及葡聚糖凝胶柱层析等方法从菌株B014发酵上清中获得一个抗菌蛋白组分(命名为B014-HSP);经Tricine-SDS-PAGE电泳检测, B014-HSP抗菌蛋白主要由分子量为23kDa的蛋白质组成;琼脂扩散法检测其热稳定性,结果显示,60~121℃下处理30 min对该抗菌蛋白抗稻黄单胞菌活性无明显影响;琼脂扩散法测定其抗细菌谱,结果显示,该抗菌蛋白在6.25 mg/mL~50 mg/mL的测试浓度下,能抑制测试细菌无色杆菌(Photorhabdus luminescens)、聚团泛菌(Pantoea agglomerans)、考克氏菌(Kocuria sp.)、欧文氏菌(Erwiniac sp.)、地毯草黄单胞菌(Xanthomonasaxonopodis)、阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)、类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.)、产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)、恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)、鞘氨醇假单胞菌(Sphingomonas sp.)、嗜麦芽假单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)生长,具有广谱的抗细菌活性,其生长抑制所需的最低浓度随测试细菌不同而异。  2.B014-HSP抗菌蛋白对稻黄单胞菌菌株X102的体外抗菌作用研究:微量液体稀释法测定该抗菌蛋白B014-HSP对稻黄单胞菌X102的最小抑菌浓度(MIC)为6.25 mg/mL,其最小杀菌浓度(MBC)为12.5 mg/mL,且在高于MBC浓度下,对稻黄单胞菌菌株X102具有溶菌效应;在亚抑菌浓度下,该抗菌蛋白能引起稻黄单胞菌X102形态异常,细胞膜通透性增加,运动性、胞外多糖产生、生物膜形成下降,同时也明显抑制其胞外淀粉酶活性,但对病菌胞外蛋白酶、纤维素酶活性无明显影响。  3.B014-HSP抗菌蛋白对水稻黄单胞菌病害的生物控制效应及其对水稻的系统抗性诱导研究。(1)人工接种稻黄单胞菌菌株X102于离体水稻叶片后,经B014-HSP抗菌蛋白处理,其叶片发病率及病斑面积显著降低(p<0.01);(2)盆栽水稻幼苗人工接种稻黄单胞菌菌株X102后,经B014-HSP抗菌蛋白处理,叶片发病率、病斑面积、植株倒伏率显著降低(p<0.01);(3)采用RT-PCR方法检测B014-HSP抗菌蛋白对水稻抗性相关基因表达的影响,结果显示,B014-HSP处理可诱导病菌XooX102感染水稻幼苗NPR1基因(病程相关基因非表达子1基因)提前高量表达且持续上调以及PAL基因(苯丙氨酸脱氨酶基因)在病菌XooX102感染或未感染水稻幼苗持续上调;此外,B014-HSP抗菌蛋白处理可抵消水稻幼苗因病菌Xoo X102感染而导致的YUCCA基因(类黄素单加氧酶基因)表达抑制并抑制NCED3基因(9—顺环氧类胡萝卜素双氧加酶基因)的上调。(4)检测B014-HSP抗菌蛋白对水稻抗氧化酶活性的影响,结果表明,B014-HSP抗菌蛋白可以诱导水稻幼苗POD和SOD的活性升高得更快、更高。  4.B014-HSP抗菌蛋白注射烟草叶片可在3h内引起典型的防御性过敏反应(HR)。  
其他文献
应用微卫星技术和RAPD技术检测了3个不同地域(湖南、广东、孟加拉)黄鳝的DNA多态性,应用酶学检测技术、电镜技术研究了Cu、表面活性剂AE(脂肪醇聚氧乙烯醚)对黄鳝生理生化特
阿尔都塞后期文本重点从马基雅维利入手寻找马克思“唯物主义的前提”,其认为“政治难题”是解读马基雅维利政治思想的重心,阐述了关联质料与形式的“政治难题”的创制方法,
巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)是一种重要的热带经济林木,其胶乳是目前工业用天然橡胶的唯一来源,由于具有特殊而重要的用途,在热带地区被广泛种植.提高胶乳产量一直是橡胶
红树林是地球上生产力水平最高的四大海洋自然生态系统之一,它也是生物多样性极为丰富的海岸生态关键区域。红树林对污染物净化是其一项重要的生态服务功能,其沉积物中的微生物
近年来,随着工业发展和科技进步,电机理论及其控制技术也得到快速发展。无轴承电机(Bearingless Motors)突破了传统电机理论范畴,通过定子槽中两套绕组的相互作用,同时产生驱动负载的电磁转矩和支撑转子的悬浮力,同时实现转子的无摩擦旋转和悬浮,目前已成为特种电气传动和磁悬浮领域重点研究方向之一。在种类繁多的无轴承电机中,无轴承异步电机(A Bearingless Induction Mot
学位
该论文对一株真菌拮抗菌Bs-1进行研究,研究表明Bs-1是革兰氏阳性好氧菌,对营养条件、理化因子要求简单,能够在各种培养基中非常迅速地生长.在4.5-9.5的pH范围和15℃-50℃的温
学位
本文通过对荣华二采区10
植物内在生菌是指那些在其生活史的一定阶段或全部阶段生活于健康植物的各种组织和器官内部的真菌或细菌,其存在一般不引起宿主产生可见的病症.由于其生活环境的隐蔽性,,这一
AREB/ABF(ABA responsive element binding protein/ABA responsive elementbinding factor)是一类重要的植物bZIP转录因子,能特异识别基因启动子上的ABRE顺式元件,在ABA依赖型