多不饱和脂肪酸对3T3-L1脂肪细胞白色脂肪棕色化的作用及机制研究

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研究目的肥胖及其相关代谢紊乱疾病问题日益突出,目前缺少行之有效的减肥方法。人体内的棕色脂肪组织因为可以促进能量代谢,调节葡萄糖和脂质水平,成为研究热点。n-3和n-6多不饱和脂肪酸(PUFAs)能够调节脂肪细胞分化和功能,改善肥胖。本研究旨在采用n-3系的二十二碳六烯酸(Docosahexaenoicacid,DHA)、二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic Acid,EPA),以及 n-6 系的花生四烯酸(Arachidonic acid,AA)处理各个阶段的3T3-L1脂肪细胞,观察其糖脂水平与棕色化相关标志基因的表达,以及线粒体数量变化,探讨n-3、n-6两类多不饱和脂肪酸对白色脂肪的棕色化作用及机制。研究方法采用浓度为10 μ和100 μM的DHA、EPA、AA分别处理3T3-L1各阶段的脂肪细胞。用试剂盒检测葡萄糖消耗量与甘油三酯水平,用Q-PCR和蛋白免疫印迹法检测棕色化标记基因的mRNA与蛋白表达量,,Q-PCR和Mito-Tracker Green染色法检测线粒体含量。结果DHA处理3T3-L1前脂肪细胞2天后,出现了白色脂肪棕色化的细胞表征。DHA和EPA处理处于分化阶段的3T3-L1脂肪细胞8天后,棕色脂肪标志性基因UCP1蛋白表达量显著增加,线粒体含量和葡萄糖消耗量增加。100 μ作用浓度下,DHA处理组的3T3-L1脂肪细胞甘油三酯水平下降,EPA处理组的细胞甘油三酯水平升高。EPA和AA处理已经完全分化成熟的脂肪细胞2天后,出现了棕色脂肪细胞表征,但是线粒体数目没有变化。在3T3-L1细胞诱导分化过程中,DHA在分化早期促进白色脂肪细胞棕色化,而EPA在分化后期促进白色脂肪细胞棕色化。结论DHA、EPA和AA在10μM和1000μM浓度下均可以促进不同阶段的3T3-L1脂肪细胞获得棕色脂肪细胞的表型,促进其线粒体生成以及葡萄糖消耗。在合适时机补充膳食PUFAs可以促进白色脂肪棕色化,可作为肥胖预防和控制的一个潜在靶标。
其他文献
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