【摘 要】
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火鸡疱疹病毒(herpesvirus of turkeys,HVT)作为一种安全有效的马立克氏病(Mareks disease,MD)异源疫苗,自七十年代以来,在世界范围内得到了广泛的应用.HVT无致病,鸡群中不能
【出 处】
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中国农业科学研究院 中国农业科学院
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火鸡疱疹病毒(herpesvirus of turkeys,HVT)作为一种安全有效的马立克氏病(Mareks disease,MD)异源疫苗,自七十年代以来,在世界范围内得到了广泛的应用.HVT无致病,鸡群中不能发生水平传播,可以在接种鸡体内长期存在,且基因组较大(170kb),可以容纳较长的外基因.因此HVT可以作为病毒载体构建二价或多价重组病毒疫苗.采用TRIZOL REAGENT试剂盒提取新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)V4C株基因组RNA,再利用RT-PCR技术扩增出全长F、HN基因的cDNA,经酶切修饰后,插入到pBS中,转化感受态E.coli JM109,经分子量比较、酶切分析及PCR等鉴定方法筛选出V4C株F、HN基因的阳性克隆. 然后,采用SAangers双脱氧末端终止法对阳性重组子进行核苷酸序列测定.在此基础上, 构建了表达NDVV4C株F、HN基HVT转移载体,即pHTUS2-FHN.其中F基因在HN基因上游,处于CMV启动子的控制之下,HN基因处于SV40早期启动子的控制下.该研究获得的表达LacZ基因的重组HV以及含TNDVF、HN基因的HVT转移载体为构建表达F、HN基因的重组HVT奠定了基础.
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