螺旋霉素生物合成代谢与调控

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该实验分别运用HPLC-ESI/MS联用法和HPLC定性定量分析了螺旋霉素生物合成发酵液中各中间代谢物和前体有机酸.共检出7种中间代谢物,分别是:FO-Ⅰ、FO-Ⅱ、NSP-Ⅰ、NSP-Ⅱ、SP-Ⅰ、SP-Ⅱ、SP-Ⅲ.在此基础上建立了螺旋霉素生物合成代谢网络动态浓度分布图.螺旋霉素生物合成代谢网络的分析表明,主要节点FO-Ⅰ、NSP-Ⅰ是挠性节点,两者构成局部独立型亚网络,有进行网络改造的可行性.同时指出螺旋霉素大环成环步骤、节点FO-Ⅰ和NSP-Ⅰ对代谢网络的影响甚大,有进行网络改造的必要性.考察了成环步骤重要酶-酰基激酶和酰基CoA合成酶对螺旋霉素生物合成的影响,在发酵中期加入二价阳离子Co<2+>和Cu<2+>能起到很高的酶激活作用,平均效价最高提高了31﹪.同时研究了添加葡萄糖对螺旋霉素生物合成网络的影响,在发酵42.5小时添加1.00E-04mol/L葡萄糖时提高发酵效价26.8﹪.
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