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【目的】 1.应用人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)经尾静脉移植到围绝经期大鼠,观察其对卵巢储备功能的影响及其持续时间。 2.探讨hUCMSCs移植是否通过旁分泌途径影响围绝经期大鼠卵巢储备功能。 3.探讨hUCMSCs移植是否通过P450arom途径影响E2的生物合成。 4.探讨hUCMSCs移植是否通过下丘脑-垂体ER-α途径影响HPO轴调节功能。 【方法】 阴道脱落细胞涂片法监测大鼠动情周期,筛选出30只月龄12~14个月的SPF级围绝经期SD大鼠模型,随机分为A组、B组(15只/组);同时选取15只3-5月龄青年雌性SD大鼠作为C组,所有围绝经期与青年SD大鼠生活条件及喂养方式相同。A组经尾静脉移植细胞缓冲液(PBS液)1ml,隔日一次,共2次;B组经尾静脉移植浓度为1×106细胞/ml的hUCMSCs单细胞悬液1ml,隔日一次,共2次;C组不予处理。于移植前、移植后14d、21d、28d采用ELISA法检测各组大鼠血清E2、AMH、FSH水平,并观察大鼠卵巢结构及卵泡计数的变化;采用PCR法检测hUCMSCs中HGF、VEGF、IGF-1基因及蛋白表达情况;采用免疫组化及western blot法检测卵巢HGF、VEGF、IGF-1、P450arom表达变化;采用免疫组化法检测大鼠下丘脑及垂体ER-α表达变化。 【结果】 1. hUCMSCs移植并不引起SD大鼠移植排斥反应。 2. hUCMSCs移植后14d、21d、28d,B组大鼠血清E2、AMH均较移植前及A组升高(P<0.05),FSH较移植前及A组降低(P<0.05);hUCMSCs移植后大鼠卵巢结构改善,各级卵泡数明显增加(P<0.05)。 3. hUCMSCs有HGF、VEGF、IGF-1基因及蛋白表达。 4.末次移植后14d、21d、28d,B组大鼠卵巢HGF、VEGF、IGF-1、P450arom表达及下丘脑-垂体ER-α表达与A组相比均明显升高(P<0.05)。 【结论】 1. hUCMSCs移植可改善围绝经期大鼠卵巢储备功能,且至少持续至移植后28d。 2. hUCMSCs移植后可能通过分泌HGF、VEGF、IGF-1影响围绝经期大鼠卵巢储备功能。 3. hUCMSCs移植可能通过促进围绝经期大鼠卵巢细胞色素P450芳香化酶的表达提高E2水平。 4. hUCMSCs移植可能通过提高围绝经期大鼠下丘脑-垂体ER-α表达改善HPO轴调节功能。