研究背景:卵巢恶性肿瘤(Ovarian cancer,OC)是最常见的女性生殖系统恶性肿瘤之一,具有高发病率、高死亡率的特点,其中上皮性卵巢癌(epithelial ovarian cancer,EOC)占多数。EOC发病隐匿,进展迅速,患者确诊时多为晚期,而错过最佳治疗时间。目前治疗方法有手术、化疗、放疗等,但疗效欠佳,因此迫切需要寻找新的诊疗策略。含MARVEL结构域的趋化素样因子超家族(CKLF-like MARVEL transmembrane domain-containing member,CMTM)是一个新基因家族,其编码产物在生物体内具有重要功能,与机体的免疫、生殖、造血等多个系统关系密切,还参与多种肿瘤的发生、发展。其中CMTM6是程序性死亡受体1(programmed death 1,PD-1)及配体(programmed cell death-ligand 1,PD-L1)的主要调控因子,多项研究表明其在肝癌、肺癌、肾癌等恶性肿瘤中表达异常,在一定程度上增强抗肿瘤免疫,促进癌细胞侵袭转移,降低生存率。因此,CMTM6有望成为肿瘤免疫治疗的新靶点。但CMTM6在卵巢癌中的作用鲜有报道,本文旨在研究CMTM6在上皮性卵巢癌中的表达情况及生物学功能,为卵巢癌的免疫治疗提供一定的理论依据。第一部分CMTM6在上皮性卵巢癌中的表达情况目的:探讨CMTM6在上皮性卵巢癌组织和正常卵巢组织中的表达情况,并分析其与EOC临床病理特征的关系。方法:采用免疫组化法对56例EOC组织和13例正常卵巢组织染色,观察记录CMTM6的表达情况,按照染色范围分为0-4分,染色强度分为0-3分,二者乘积为染色总评分(0-12分),>4分为高表达,≤4分为低表达。结果:CMTM6在上皮性卵巢癌组织和正常卵巢组织中的阳性表达率分别为62.5%和30.77%,与肿瘤细胞分级呈正相关,但与年龄、FIGO分期、组织学类型、淋巴结转移、肿瘤大小等无关。结论:与正常卵巢组织相比,CMTM6在上皮性卵巢癌组织中高表达,且与肿瘤细胞分级呈正相关,表明CMTM6参与卵巢癌的发生发展。第二部分CMTM6对上皮性卵巢癌细胞生物学功能的影响及机制目的:通过体外实验检测CMTM6对卵巢癌SKOV3细胞生物学功能的影响及机制。方法:应用si RNA干扰技术构建CMTM6敲减组细胞(si RNA-CMTM6)和阴性对照组细胞(si RNA-NC),并经实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,q RT-PCR)及蛋白质印迹法(Western blot,WB)检验转染效率;通过细胞划痕实验、CCK8实验、平板克隆形成实验观察细胞生物学行为的改变;采用q RT-PCR和WB检验CMTM6和PD-L1在m RNA、蛋白水平的相关性;WB测定上皮间质转换(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标记物N-cadherin蛋白、E-cadherin蛋白的表达,探索CMTM6与EMT之间的关系。结果:与NC组相比,CMTM6敲减组细胞CMTM6的m RNA和蛋白表达明显下降,癌细胞的增殖、迁移和转移能力也随之下降;PD-L1的m RNA表达无明显变化,但蛋白表达下降;EMT标记物N-cadherin蛋白表达减少、E-cadherin蛋白表达升高。结论:在卵巢癌SKOV3细胞中,沉默CMTM6可以抑制细胞上皮间质转化,降低增殖、迁移和转移能力,且下调PD-L1在蛋白水平的表达。