系统性红斑狼疮(SLE)是一种复杂的自身免疫性疾病,可累及皮肤、肾脏、关节等多种脏器,免疫调节失衡是SLE发病的关键因素。本课题通过分析SLE患者和健康人外周血Tfh细胞和CD8~+Treg细胞亚群格局,探讨CD8~+Treg细胞对Tfh细胞的调控机制,阐明SLE发病新机制,为SLE诊断和治疗提供新线索。首先,应用流式细胞术分析健康对照和SLE患者外周血Tfh细胞比例,发现SLE患者外周血Tfh细胞(CD4~+CXCR5~+ICOS~+)比例比对照组显著增加,并与SLE疾病活动指数(SLEDAI)和24小时尿蛋白量呈显著正相关;ELISA结果显示SLE患者血浆IL-21水平显著升高。其次,应用流式细胞术分析CD8~+Treg细胞亚群格局,结果显示SLE患者外周CXCR3~+CD8~+Treg细胞比例下降,且与SLEDAI及Tfh细胞比例呈显著负相关。上述实验结果提示Tfh细胞和CXCR3~+CD8~+Treg细胞在SLE发病中发挥重要作用。我们通过CFSE标记的CD4~+T细胞与CXCR3~+CD8~+Treg细胞共培养实验探究CXCR3~+CD8~+Treg细胞的免疫调节功能,发现CXCR3~+CD8~+Treg细胞选择性抑制IL-21~+CD4~+T细胞(Tfh)增殖,而CXCR3~+CD8~+Treg细胞的免疫抑制功能在SLE患者中明显受损。进一步探讨CXCR3~+CD8~+Treg细胞对Tfh细胞的调控机制,发现Tfh细胞选择性高表达HLA-E;CXCR3~+CD8~+T细胞的细胞因子表达格局显著不同于CXCR3~-CD8~+T细胞;通过抗体阻断实验我们发现CXCR3~+CD8~+Treg细胞并不依赖抑制性细胞因子(如IL-10、IL-4等)发挥免疫抑制作用,但通过识别HLA-E的途径对Tfh细胞进行调节。通过本课题的研究,我们首次发现SLE患者中降低的CXCR3~+CD8~+Treg细胞比例与SLEDAI及Tfh细胞比例呈显著负相关,并首次阐明CXCR3~+CD8~+Treg细胞依赖于HLA-E分子选择性抑制Tfh细胞增殖,提示CXCR3是HLA-E限制性CD8~+Treg细胞的表型分子;CXCR3~+CD8~+Treg细胞免疫抑制功能在SLE患者中显著受损,可能是导致SLE患者Tfh细胞比例升高的主要原因。本研究结果为阐明SLE发病新机制和探索SLE诊断与治疗新方案提供理论和实验基础。