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第一部分GDM胎盘及脐血PGC-1α启动子DNA甲基化水平的焦磷酸测序分析 目的：宫内暴露于高糖环境可增加子代代谢性疾病的发生风险。胎儿可能通过 DNA甲基化编程介导这一发病机制，本部分利用焦磷酸测序的方法测定GDM胎盘及脐血中PPARGC1A（PGC-1α）启动子DNA的甲基化水平。 方法：本部分研究共纳入58例在我院行常规剖宫产术的孕母，记录孕妇的年龄、血糖值、体重指数、产次等。剖宫产后立即收集胎盘组织以及脐血组织，提取胎盘以及脐血组织中的基因组DNA，并经过亚硫酸氢盐转化，通过PCR技术扩增PGC-1α启动子的目的序列，最后用焦磷酸测序（pyrosequencing）的方法对 PGC-1α启动子的CpG位点-841，-816，-783，-617，-652，-260的甲基化水平进行测定；测定脐血血糖及胰岛素。并利用SPSS软件对PGC-1α甲基化水平进行分析。 结果：根据IADPSG标准纳入GDM组24例，正常血糖组34例。GDM组妊娠24-28周血糖水平（空腹血糖、餐后1h血糖、餐后2h血糖）以及脐血血糖水平高于正常对照组(p<0.01)。GDM组脐血HOMA-IR略高于正常组(p<0.05)。两组的胎盘与脐血中 PGC-1α启动子特异性 CpG位点的平均甲基化水平无明显差异。同一位点脐血的PGC-1α启动子特异性CpG位点的甲基化水平高于胎盘组织。 结论：PGC-1α启动子特异性CpG位点的DNA甲基化水平具有组织特异性，可能不存在具体血糖阈值以评估高糖风险。 第二部分胎盘PGC-1α启动子DNA甲基化与妊娠期血糖的相关性分析 目的：宫内暴露于高糖环境可增加后代代谢性疾病的发病风险。孕母高血糖所致胎儿编程的潜在机制尚未完全明确，近来的研究报道表明表观遗传修饰可能在这一过程中起重要的作用。过氧化物酶体增殖物激活受体γ的共激活因子-1α（PGC-1α）在多种生物过程中发挥着重要的作用，可介导机体能量平衡和代谢过程，是联系外界环境与能量代谢的枢纽。本部分旨在分析PGC-1α启动子的DNA甲基化水平与孕妇妊娠期血糖水平的相关性。同时测定胎盘组织的线粒体含量和PGC-1α蛋白的表达情况，并分析其与 PGC-1α启动子的DNA甲基化水平之间的相关性。为健康和发育起源学说提供实验依据。 方法：本研究纳入同济医院58例实行常规剖宫产术的母亲，母孕期血糖浓度在孕24-28周时需经75g OGTT实验测定，并根据孕期血糖的水平将58例孕妇分为GDM组以及正常对照组。并记录孕妇的年龄、血糖值、体重指数、产次等参数。此外，在临床实验室测定相关代谢参数。通过western blot技术对胎盘PGC-1α蛋白水平进行测定；通过Real time PCR的方法对胎盘线粒体含量进行测定。并利用SPSS软件分析PGC-1α启动子特异位点的甲基化水平与代谢参数的相关性。 结果：在本部分共分为 GDM组和正常对照组两个组。孕妇血糖水平与胎盘 PGC-1α启动子的甲基化水平呈正相关，与脐血PGC-1α启动子特异位点的甲基化水平呈负相关。在GDM组，胎盘PGC-1α启动子特异位点的甲基化水平与OGTT餐后2h血糖呈显著正相关。胎盘PGC-1α启动子特异性的CpG位点与胎盘PGC-1α蛋白之间无相关性。 PGC-1α启动子特异位点DNA甲基化水平与mtDNA/nDNA之间存在负相关。胎盘 CpG位点甲基化水平与脐血 HOMA-IR之间呈正相关。其他代谢参数与PGC-1α甲基化水平尚未发现显著相关性。 结论：宫内暴露于高糖环境可能介导了PGC-1α启动子DNA甲基化水平的改变，这可能是参与其子代代谢编程的重要机制之一。 第三部分GDM孕妇脐血betatrophin水平与妊娠期血糖相关性的研究 目的：宫内暴露于高糖环境可增加子代代谢性疾病的发生风险。Betatrophin是促进胰岛β细胞增值和调节脂类代谢的一个关键因子。Betatrophin对营养信号高度敏感，多种病理生理条件下可诱导其改变。我们假设宫内暴露于高糖环境的新生儿脐血中betatrophin的浓度升高，并且脐血betatrophin与妊娠期血糖水平及胎盘PGC-1α启动子甲基化水平相关。 方法：本部分研究纳入了同济医院54例实行常规剖宫产术的孕母。母孕期血糖浓度通过孕24-28周的75g OGTT实验来测定，并据此数据分为妊娠糖尿病（GDM）及正常组。分娩后立即收集脐血和胎盘组织，在临床实验室测定相关代谢参数。用荧光定量PCR（real time PCR）方法检测胎盘的线粒体含量。脐血betatrophin的浓度通过市售的Elisa试剂盒测定。 结果：GDM组脐血betatrophin浓度水平高于正常对照组(P<0.05)。脐血betatrophin的浓度与胎盘PGC-1α启动子甲基化水平无明显相关性。脐血betatrophin的浓度与母孕期2-h血糖浓度( P<0.05)、脐血胰岛素(P<0.01)、以及HOMA-IR(P<0.01)水平呈正相关。GDM组胎盘线粒体含量高于正常对照组，且与脐血betatrophin水平呈负相关（p<0.01)。 结论：脐血betatrophin可能是宫内暴露于高血糖及胎儿胰岛素抵抗的潜在生物标志物，并可能预测GDM对子代远期代谢的不良影响。