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目的:建立胎鼠神经干细胞体外培养的模型,为神经干细胞移植治疗感音神经性耳聋创造基础。
方法:取胎龄为14.5天的昆明小鼠脑组织,体外于无Ca、Mg的D-Hank‘s溶液中进行分离,胰酶消化,单细胞悬液置于含有20%B27、20ng/mlEGF、20ng/mlbFGF的培养基中悬浮培养。用Nestin免疫细胞化学法鉴定神经干细胞,传代培养。
结果:所取的胎鼠细胞组织细胞可形成集落样生长的神经干细胞团,Nestin免疫细胞化学染色阳性,阳性率为为89.86%±1.88%,占总细胞数85%以上。
结论:小鼠的神经干细胞可经体外分离纯化,建立细胞系,具有明显的增殖能力可作为神经干细胞移植治疗感音神经性耳聋的供体细胞。