沙蒿籽水溶性多糖的分离纯化及其组分ASP-A的结构与活性研究

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白沙蒿在我国西北地区分布广,其种籽中水溶性多糖得率高达7%左右,可用于降血糖等。但国内外对沙蒿籽水溶性多糖的物理化学性质、结构和生物活性研究较少。本文以白沙蒿籽为材料,利用生物大分子研究的最新技术和现代分离分析手段,对沙蒿籽多糖进行了比较系统的研究,以期对沙蒿资源的进一步研究开发奠定基础。主要研究内容包括以下几个部分: 1.沙蒿籽水溶性粗多糖的提取及物理化学性质研究采用水提一醇沉法提取沙蒿籽水溶性粗多糖ASP,得率为6.76%。用气相色谱分析其单糖组成为Rha:Ara:Xyl:Man:Glc:Gal:GlcA:GalA=1:12.0:54.6:50.6:76.4:39.4:5.8:9.3;测定ASP的总糖含量为95.65%,糖醛酸含量为36.92%;紫外光谱表明该多糖不含蛋白质,红外光谱表明其具有多糖的特征吸收。 2.沙蒿籽水溶性多糖的分离纯化及其均一组分ASP.A的物理化学性质研究用DEAE.Cellulose离子交换柱将粗多糖ASP进行分离纯化得到ASP-1、ASP-2、ASP-3、ASP-4四个组分。本文将第一个组分ASP.1通过Bio-Gel P.150柱色谱进一步纯化,得到细多糖ASP.A,并通过高效凝胶渗透色谱法鉴定其为均一多糖组分,分子量约为55.1 kDa。气相色谱分析其单糖组成为Ara:Man:Glc:Gal=1:5.00:9.21:3.39。 3.ASP.A的结构初步分析ASP-A的红外光谱分析显示有呋喃糖环的特征吸收;气相色谱-质谱联用分析甲基化的ASP.A的一级结构中的主要糖苷键类型为2,3,5.Me3.Ara、2,4-Me2-Ara、2,3,4,6-Me4-Man、2,3,4,6-Me4-Gal、2,3,6-Me3-Glc、2,3-Me2-Glc,由此推断Glc是构成ASP-A主链的核心结构;根据部分酸水解结果推断Ara和Gal形成ASP.A的支链和主链末端残基。 4.沙蒿籽水溶性粗多糖ASP及其组分ASP-A对小鼠免疫细胞作用的初步研究研究结果表明沙蒿籽水溶性多糖.ASP.A体外应用时在Con A的诱导下,在一定浓度范围内对小鼠脾细胞增殖反应具有明显的增强活性。而沙蒿籽水溶性粗多糖ASP对小鼠脾细胞增殖反应无明显影响。
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