珊瑚树化学成分及生物活性研究

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珊瑚树Viburnum odoratissimum是忍冬科(Caprifoliaceae)荚蒾属植物,为常绿灌木或小乔木,原产我国,主要分布于湖南、福建、广东、台湾及浙江,日本、朝鲜也有分布。始载于《中国高等植物图鉴》,其枝叶可入药,有通经活络功效,主治风湿痹痛、跌打肿痛、骨折。  珊瑚树中化学成分主要含有vibsanin型二萜类,二萜类化合物基本结构虽繁杂多样,但其生物活性却有类似性,国内外研究报道表明大部分二萜类化合物具有抑制肿瘤细胞增殖活性。而目前研究报道珊瑚树主要有细胞毒、抑菌、鱼毒等生物活性,为进一步研究珊瑚树中抑制肿瘤细胞增殖活性以及新生物活性的物质基础,本文以系统分离方法为研究手段,对珊瑚树展开化学成分的研究。采用甲醇室温浸泡提取,乙酸乙酯萃取,进一步以加压硅胶柱色谱、开放 C18柱色谱和凝胶柱色谱分离,制备高效液相色谱纯化,从珊瑚树中分离得到了21个化合物,以HR-ESI-MS、1H NMR、13C NMR、1H-1H COSY、HMBC、HSQC、ROESY等波谱技术以及化学方法,鉴定了各个单体化合物的结构,分别为:vibsanol C(1),vibsanin B(2),vibsanin C(3),vibsanin L(4),vibsanin A(5),6α-hydroxylup-20(29)-en-3-on-28-oic acid(6),viburnumtol(7),vibsanin X(8),vibsanin Y(9),vibsanol A(10),vibsanol B(11),vibsanol B1(12),(+)-儿茶素(13),(-)-epi-儿茶素(14),紫云英苷(15),三叶苷(16),金丝桃苷(17),异槲皮苷(18),山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖-(1→6)-O-β-D-葡萄糖苷(19),山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖-(1→2)-O-β-D-半乳糖(20),山奈酚-3-O-β-D-槐糖苷(21)。其中化合物1、7、8、9、12为新化合物,化合物16为首次从珊瑚树中分离得到。  本研究对分离得到的所有化合物进行了抑制肿瘤HL-60细胞系增殖活性筛选和对7个十一元环二萜类化合物2、4、5、8、9、10、12还进行了抑制肿瘤 K562、HepG2、DU145、Jurkat四个细胞系增殖活性筛选。结果发现化合物2、4、5、6、7、8、9、10、11、12和15对HL-60细胞系的增殖具有显著抑制活性,其中化合物6抑制活性最显著;十一元环二萜类化合物对不同肿瘤细胞系的增殖表现出不一致的抑制活性,通过对每个化合物进行这五个细胞系增殖抑制活性结果分析,发现化合物2、4、5、8、9、10对Jurkat细胞增殖抑制活性最显著,而化合物12对K562细胞增殖抑制活性最显著,总体来说化合物2对这五个细胞系增殖抑制活性较其它化合物显著;通过对这7个十一元环二萜类进行每个细胞系增殖抑制活性结果分析,发现化合物9对HL-60、K562和HepG2细胞系增殖抑制活性最显著,化合物2对DU145细胞系增殖抑制活性最显著,化合物5对Jurkat细胞系增殖抑制活性最显著,总体来说十一元环二萜类化合物对Jurkat细胞增殖抑制活性较其它细胞系显著。  本研究还对分离得到的黄酮类化合物13~21进行了抑制血小板聚集活性筛选和三萜类化合物6和7进行了诱导血小板聚集活性筛选,以及对化合物7进行了诱导血小板聚集作用机制的初步研究。结果发现黄酮类化合物13~21对U46619诱导的大鼠血小板聚集表现出负抑制活性,对ADP或AYPGKF诱导的大鼠血小板聚集表现出微弱抑制活性,而13、14、16、19对AYPGKF诱导的人洗涤血小板表现出显著抑制活性;三萜类化合物6和7均能诱导大鼠血小板和人洗涤血小板聚集,且其诱导人洗涤血小板聚集活性较大鼠血小板聚集活性显著,其中化合物6诱导血小板聚集活性较化合物7显著;化合物7是一种血小板激动剂,主要依赖于ADP的释放,通过PLC/IP3/PKC和Gi信号通路诱导血小板聚集。
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