七氟烷对新生大鼠乙酰胆碱酯酶活性、α7-nAChR表达及学习记忆的影响

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目的:⑴探讨七氟烷对新生大鼠(7日龄 SD大鼠)学习记忆能力及乙酰胆碱酯酶活性、α7-nAChR(烟碱型乙酰胆碱受体)表达的影响。⑵为临床安全使用七氟烷提供相关参考。  方法:30只7日龄SD大鼠,体重10-15g,雌雄不拘,随机分为C、A、B三组,每组10只:①C组为对照组,分为C1和C2组,各组5只。均在特制有机玻璃箱内吸入氧气4h后,C1组立即处死,取海马组织备用,C2组饲养至21d时进行行为学实验。②A组为实验组,分为A1和A2组,各组5只。均在特制有机玻璃箱内吸入七氟烷4h后,A1组立即处理,取海马组织备用,A2组饲养至21d时进行行为学实验。③B组为乙酰胆碱酯酶活性组,分为B1和B2组,B1组在特制有机玻璃箱内吸入氧气4h,B2组在特制有机玻璃箱内吸入七氟烷4h,实验处理后处死B组所有大鼠,取海马备用。④C1、A1组使用Trizol一步法提取海马组织总RNA,Real-time PCR方法测定α7-nAChR表达含量。提取海马组织总蛋白,BCA法进行蛋白定量,用蛋白免疫印迹(Western Blotting)法分别检测C1、A1组α7-nAChR蛋白的表达情况。⑤使用比色法观察C1组和C2组乙酰胆碱酯酶活性。⑥C2、A2组大鼠饲养至21d龄时采用跳台仪观察学习记忆能力改变情况。  结论:⑴发育早期大鼠急性暴露于2.3%七氟烷4小时后,可以导致大鼠远期学习记忆功能损害。⑵7日龄大鼠急性暴露与2.3%七氟烷4小时候后,发生远期学习记忆功能损害可能与α7-nAChR在mRNA水平及蛋白水平表达降低有关。⑶7日龄大鼠急性暴露与2.3%七氟烷4小时候后,发生远期学习记忆功能损害可能与乙酰胆碱酯酶活性降低有关。
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