目的：　　以哮喘小鼠模型为研究对象，探讨在哮喘发生发展的病理过程中，其肺组织 GITR-GITRL（GITR，糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体；GITRL，GITR配体）表达水平与分泌炎症因子 IL-5和/或 IL-13的ILC2s(Group2 Innate Lymphoid Cells)及其活性的关系，以从区域免疫学的角度探讨哮喘时Th2极化免疫微环境的改变，进一步阐明哮喘发生的免疫机制和寻找新的干预途径。　　方法：　　⑴用OVA(OVA, ovalbumin)蛋白致敏并激发小鼠，建立小鼠哮喘疾病模型并验证评价哮喘的病理改变。　　⑵流式细胞分析技术检测小鼠肺组织 GITR/GITRL的表达和 ILC2s的数量，同时检测ILC2s表面GITR的表达。　　⑶实时荧光定量 PCR检测哮喘小鼠肺组织 GITR/GITRL表达量，以及ILC2s的关键转录因子和特征性细胞因子的mRNA水平。　　⑷取本实验室制备的mGITRL-Pet-32a-E.coli BL-21菌种凃板挑菌，诱导GITRL蛋白表达，鉴定后纯化去内毒素。尾静脉注射mGITRL融合蛋白进行哮喘小鼠干预试验，检测其肺组织ILC2的数量及活性。　　⑸统计学分析：受试小鼠随机分组，所有试验至少重复三次。试验数据以mean±s.e.m(平均数±标准差)表示。统计学分析采用GraphPad软件。两组间数据比较用独立样本T检验，相关性分析用 Pearson相关分析法。P<0.05表明差异有统计学意义。　　结果：　　⑴模型组小鼠表现出典型哮喘症状和病理指征：OVA致敏激发后小鼠烦躁不安，弓背且腹部明显鼓动，排便增多，出现点头样喘息、呼吸加深加快等哮喘的临床表现；HE染色镜下可见：模型组小鼠肺泡间及其伴行血管周出现大量炎症细胞浸润，气道粘膜皱襞减少，goblet细胞（杯状细胞）肥大增生；同时，血清总IgE水平明显升高且伴有Th2型细胞因子水平升高。模型成功率达92％（23:25）。　　⑵流式细胞技术检测结果：ILC2s表面有少量GITR表达，发生哮喘时GITR表达增多。与正常小鼠相比哮喘小鼠肺组织中ILC2数量以及GITR+细胞数量也明显增加。　　⑶实时荧光定量PCR技术检测结果表明：与对照组小鼠相比，哮喘小鼠肺组织ILC2s的特征性转录因子、GITR/GITRL系统表达量以及Th2型细胞因子水平均明显升高。　　⑷带有表达载体mGITRL-pET-32a的细菌E.coli BL-21，用1mmol/L的IPTG（isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,异丙基-β-D硫代半乳糖苷）30℃诱导6h，所表达的融合蛋白分子量大小约为40KD。流式细胞技术检测发现，注射mGITRL融合蛋白后，哮喘小鼠肺组织ILC2的数量比注射对照蛋白的对照组小鼠明显升高。　　结论：　　哮喘小鼠肺组织流式细胞分析检测结果提示，肺组织ILC2s的数量明显增加且表面见有GITR表达，ILC2s相关细胞因子的表达水平也同步上调，同时发现哮喘肺组织GITR和GITRL均明显增强。ILC2的这种优势状态与GITR/GITRL的表达呈明显正相关。外源性GITRL蛋白应用于哮喘小鼠模型则进一步促进肺组织免疫微环境中ILC2的活性。