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目的：建立由D-氨基半乳糖诱导的急性肝衰竭大鼠模型，观察“回阳方”对急性肝衰竭大鼠肝功能、病理学及生存期的影响，并以此为基础进一步探讨其抗肝衰竭的抗炎免疫分子机制，为肝衰竭的防治开拓新思路并提供科学依据。 方法：通过单次腹腔注射不同剂量的D-氨基半乳糖（D-galactosamine，D-GalN）确定构建急性肝衰竭(ALF)大鼠模型的最佳剂量。70只体重为180±20g的雌性SD大鼠以是否接受造模和不同的药物干预随机分为四组：空白组、模型组、复方甘草酸苷组（美能组）和回阳方组（实验组）。其中空白组含10只大鼠，不接受 D-GalN造模，以等剂量的生理盐水代替，腹腔注射前3天给予蒸馏水10ml/kg/d灌胃。模型组含20只大鼠，接受D-GalN造模，造模前3天给予蒸馏水10ml/kg/d灌胃。美能组含20只大鼠，接受D-GalN造模，造模前3天给予成人等效临床剂量的美能15.6mg/kg/d灌胃。实验组含20只大鼠，接受 D-GalN造模，造模前3天给予成人等效临床剂量的“回阳方”18.8g/kg/d灌胃。灌胃持续5天。造模后36 h经大鼠股动脉取血4ml置于干燥管中,另取2ml置于枸橼酸钠抗凝管中,均在3000转/分钟的速度下进行离心10分钟，置血清于-20℃保存以备检测ALT、AST、TBIL、ALB、CHE及PT水平。取血后断颈处死大鼠，并取肝组织，置于10％中性福尔马林液固定后放至-70摄氏度的冰箱储存，用于：常规 HE染色肝组织病理学观察，并记录病理评分；实时荧光定量 PT-PCR检测TLR4、NF-κB、HMGB1和caspase-3的表达水平；免疫组织化学染色检测 PCNA表达水平。另有55只体重为180±20g的雌性SD大鼠以用样的造模及给药方案随机分为空白组、模型组、美能组和实验组，各组大鼠的只数分别为10、15、15、15只。本组用于观察造模后大鼠的一般情况、行为学改变和生存期，并描绘生存曲线。观察时间点为腹腔注射伊始到注射后96小时。 结果：⑴预实验确定诱导ALF的最佳造模剂量为1.4g/kg。⑵一般情况：腹腔注射D-GalN后，模型组大鼠逐渐出现食欲下降、行为迟钝及对刺激的灵敏度下降等一系列行为学改变，同时诱发尿失禁，尿黄，精神不振，嗜睡，烦躁，抽搐，出血等严重症状。与模型组相比，经“回阳方”治疗后，实验组大鼠上述症状均明显减轻，且更重要的是，在治疗过程中没有发现与药物相关的不良反应。⑶生存期：腹腔注射后96小时，模型组、美能组、实验组的生存率分别为33.3%、46.7%、66.7%，三组的差异无统计学意义（P>0.05）；经Kaplan-Meier分析，估计模型组、美能组、实验组的平均生存时间分别为64.6、71.9、83.9小时,同时经过log-rank检验提示，实验组与模型组相比，差异有统计学意义（P<0.05）；实验组与美能组相比，差异无统计学意义（P>0.05）；而美能组与模型组相比，差异无统计学意义（P>0.05）。⑷疗效指标：肝功能：腹腔注射后36h，与空白组相比，模型组大鼠ALT、AST、TBIL水平显著升高，而ALB、CHE水平则显著下降，差异均有统计学意义（P<0.05）；与模型组和美能组相比，实验组ALT、AST、TBIL水平显著降低，而ALB、CHE水平则显著升高，差异均有统计学意义（P<0.05）；凝血功能：腹腔注射后36h，与空白组相比，模型组大鼠PT显著延长，差异有统计学意义（P<0.05）；与模型组和美能组相比，实验组的PT显著缩短，差异均有统计学意义（P<0.05）；③肝组织病理评分：腹腔注射后36h，各组大鼠肝组织均有不同程度的病理损害，其中模型组最严重，经美能或回阳方治疗后，病理损伤均有减轻，且以回阳方组最佳。与模型组和美能组相比，实验组病理损害评分明显下降，差异均有统计学意义（P<0.05）。⑸机制指标：腹腔注射后36h，经RT-PCR检验，与空白组相比，模型组大鼠TLR4、NF-κB、HMGB1、caspase-3水平显著升高，差异均有统计学意义（P<0.05）；与模型组和美能组相比，实验组TLR4、NF-κB、HMGB1、caspase-3水平显著降低，差异均匀统计学意义（P<0.05）；腹腔注射后36h，经免疫组织化学染色检测，与空白组相比，各组大鼠肝组织PCNA表达有所增加，差异均有统计学意义（P<0.05）。其中以实验组为最佳，与模型组和美能组相比，差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论：①本实验中，显著升高的ALT、AST、TBIL水平，明显延长的PT，显著降低的ALT、CHE水平，明显增加的肝组织病理评分以及快速的死亡率均表明急性肝衰竭大鼠模型造模成功，且D-GalN最佳剂量为1.4g/kg。②“回阳方”能显著改善D-GalN诱导的急性肝衰竭大鼠的一般状态，有效保护肝功能，改善凝血功能，降低肝组织病理损伤，延长生存时间。③“回阳方”抗D-GalN诱导的急性肝衰竭大鼠肝损伤的可能作用机制：通过抑制HMGB1/TLR4/NF-κB通路对抗炎症反应，从而有效地保护肝脏；通过下调caspase-3的表达，进而抑制肝细胞的坏死，从而发挥抗肝衰竭作用；通过上调PCNA的表达，促进肝细胞再生，进而发挥保护肝脏的作用。