将酶固定化在基材之上既可以使固定化的酶重复利用,降低酶的催化成本,又具有使酶在反应结束后容易与底物分离,避免酶对底物污染的优点。聚合物材料因其低成本、易加工以及柔性等特点成为酶固定化的一种重要基材。但聚合物基材普遍存在表面能低和表面惰性的缺点,因此需要对基材表面进行改性以固定化酶。本论文基于可见光可控/活性接枝交联聚合方法,设计了一种反应温和且条件简单的在聚合物基材表面固定化酶新方法,并对其固定化酶的应用进行了探究。该方法首先在聚合物基材表面种植光引发剂异丙基硫杂蒽酮(ITX),之后在接枝有ITX的聚合物基材表面引发可交联单体聚乙二醇二丙烯酸酯(PEGDA)的可控/活性接枝聚合。若在接枝过程前将单体溶液与酶相混合,接枝反应后即可实现酶在聚乙二醇(PEG)网布之中的原位网格固定。论文主要取得以下结果：1、探究了可见光可控/活性接枝交联聚合的机理,并利用该反应在低密度聚乙烯(LDPE)膜表面分别通过三明治结构以及凹槽结构接枝PEG网布用以原位网格固定化脂肪酶,并使用该载酶膜催化合成葡萄糖棕榈酸酯。通过控制接枝反应时间、单体溶液中PEGDA的含量以及接枝反应的加液量,可以对接枝厚度之范围进行大规模精确可控(10-1—103μm)。又通过XPS表征分析发现,接枝网布层上仍然含有ITX残基,从而证明了接枝聚合的“活性”特征。可见光辐照2小时的酶膜其活性是使用紫外光辐照150秒的酶膜的5倍。当温度为50℃时,网格固定的脂肪酶其酯化率由游离酶的42%上升为67%。当使用0.5%(v/v)的戊二醛(GA)对脂肪酶交联后,固定化脂肪酶的酶活为0.71 U,酶载率为89%,催化7批活性没有发生明显下降。2、在聚合物基材表面接枝柔性聚合物刷来固定化纤维素酶催化滤纸(纤维素)水解反应。以无纺布为基材,当使用的接枝聚合单体溶液比例丙烯酸(AA)为30%(v/v),PEGDA为20%(v/v)吸附固定化酶时,在0.01 mol·L-1的柠檬酸缓冲液中进行催化,固定化纤维素酶的催化效率可达到最高的45%,但使用六个批次后催化效率降为了5%；而在无纺布接枝的聚甲基丙烯酸缩水甘油酯刷(PGMA)上连接聚乙烯亚胺(PEI)后,使用GA将纤维素酶上的氨基与PEI进行共价反应,在同样催化条件下,催化反应持续10个批次,催化滤纸水解率基本不变。3、为了提升纤维素的水解效率并降低纤维素乙醇的生产成本,设计了一种在聚丙烯无纺布之上使用可见光可控/活性接枝聚合原位网格固定β-葡萄糖苷酶(BG)于PEG网布中的手段。通过SEM、AFM、 XPS以及CLSM等仪器对BG酶膜进行表征,证明了BG酶成功的固定在了无纺布之上的PEG网格之中。固定化BG酶膜催化滤纸(纤维素)水解之最适合条件为：0.25%(v/v)的GA对55 mg BG酶交联处理半小时,加入100μL的游离纤维素酶,在50℃以及pH为4.8的柠檬酸缓冲液中进行水解反应。与不加入BG酶膜的体系相比,其水解纤维素的转化率在48小时内提高了40%。对BG酶进行GA(0.25%,v/v)交联,98%的酶被固定在网格之中,固定化BG酶在反应15个批次后仍保留有较高的活性。4、在可见光可控/活性接枝聚合的基础之上,以胰蛋白酶和谷氨酰胺转移酶为例,提出了一种分隔网格固定化多酶的方法,制备了双酶分隔固定化酶膜(A型和B型)。双酶分隔固定化酶膜(A型)利用活性接枝的特点,在一层固定化酶的聚合物网布之上接枝另一层固定化酶聚合物网布；而双酶分隔固定化酶膜(B型)则将两种酶的单体可聚合溶液涂敷在膜的两侧从而一步法分隔固定化两种酶。使用XPS以及AFM等对两种膜分别进行结构的表征,结果表明两种酶均可以成功的固定化在不同的网布层之中。制备的双酶分隔固定化酶膜大于90%的酶不会发生泄漏。与混合固定化酶相比,分隔固定化酶的酶活性保留更多,在重复使用4个批次以后,其活性并没有发生明显的下降。以此为基础构建了“固定化多酶串并联系统”。并以脂肪酶、胰蛋白酶和谷氨酰胺转移酶为例,利用此系统制备了新型抗肿瘤靶向药物LTV-阿扎胞苷和LTV-阿糖胞苷。使用FT-IR、NMR以及MS等对靶向药物的合成过程进行表征,靶向药物结构符合预期。对靶向药物进行了MCF-7乳腺癌细胞毒性试验,与原药作为对比,靶向药物对于MCF-7细胞毒性更大。