人类于1989年成功分离得到丙型肝炎病毒(HCV),HCV以其高传染性和对肝组织严重的破坏性引起了各国科学工作者的广泛关注。在他们的共同努力下,人类对HCV的生活史和基因表达产物有了比较全面的认识,为进一步揭示HCV病理学过程,寻找治疗方法和研发新药奠定了坚实的基础。然而,HCV的秘密并没有完全呈现在人们面前。2001年美国南加州大学的研究小组报道:新发现位于HCV核基因区内有一个16-17kd的F蛋白,编码该蛋白的基因与HCV核基因序列有部分重叠。该蛋白是由于核糖体移码突变产生的,并且广泛存在于HCV的多个亚型。F蛋白的确切功能尚不清楚,但有报道显示F蛋白可以下调p21的转录活性,F蛋白对人类认识HCV以及最终攻克HCV具有潜在的重要意义。HCV的F蛋白是HCV核基因(core gene)移码突变的产物。本研究采用酵母双杂交技术,筛选与F蛋白相互作用的蛋白基因,间接推测F蛋白可能具有的生物学功能。通过构建F蛋白诱饵质粒,转化酵母AH109后,与含肝脏cDNA文库质粒的酵母SFY526进行配合,在涂有X-α-gal营养缺陷型培养基(SD/-Trp-Leu-His-Ade)上筛选生长。挑选蓝色克隆提取其质粒,电转化大肠杆菌Top10后,取大肠杆菌阳性克隆进行测序,并在Gene Bank比对分析。得到5个与F蛋白特异性相互作用的基因克隆:APOH,C8B,HP,RBP4,EEF2。此外,为了了解F蛋白的表达情况,将F蛋白分别在大肠杆菌表达菌株BL21和人T293细胞进行了原核和真核表达,来初步了解F蛋白的表达情况。通过对F蛋白的基因及蛋白序列进行生物信息学分析,对其抗原表位和可能具有的二级结构进行了预测,为F蛋白进一步研究进行了有意义的探索。