甘蔗是我国重要的糖料作物，也是一种潜在的能源作物。甘蔗病毒病造成甘蔗产量、含糖量严重损失。调查发现我国甘蔗已普遍受甘蔗花叶病毒(SCMV)、高粱花叶病毒(SrMV)和甘蔗黄叶病毒(SCYLV)侵染，抗病品种的培育十分迫切。由于在栽培甘蔗中缺乏有效的抗性资源，加之甘蔗是高度杂合的异源多倍体或非整倍体无性繁殖作物，常规手段难以育成抗病品种。本研究利用RNAi原理，构建了具同时诱，导上述三种病毒基因沉默潜能的多价抗病毒基因，并试图通过农杆菌介导法转化甘蔗胚性愈伤组织，以期获得具广谱抗病性的转基因甘蔗植株，为抗病品种的培育打下材料基础。取得了如下主要结果：　　 1.采用生物信息学方法，分别从甘蔗三种主要病原病毒基因组中，筛选到长度为200-300nt高度保守的靶标序列，SCMVcp、SrMVnib和SCYLVcp，用以构建诱导基于RNAi的抗病毒基因。　　 2.通过RT-PCR及产物克隆，从感病甘蔗组织中获得了上述三个靶标cDNA片段，并构建了其串联重组体。　　 3.通过分子重组技术，获得了一个基于pDM18-T载体的包含反向重复序列克隆位点的重组中间质粒，再将病毒靶标cDNA串联体正反向插入中间质粒，最后构建了基于pCAMBIA1300的具诱导三种病毒RNAi潜能的植物表达载体。其表达框特征是：由35S启动子和OSC终止子操纵的、含水稻糯性α基因内含子的三种病毒靶标序列串联体反向重复序列。　　 4.通过电激转化法将所构建的植物表达载体转入农杆菌EHA105，获得了用于甘蔗遗传转化的工程菌。　　 5.优化了甘蔗胚性愈组织诱导及植株再生体系，以甘蔗品种“粤糖93-159”和“粤糖00-236”为受体，通过农杆菌介导，在选择标记潮霉素浓度为50mg/L的条件下，获得了300丛可能的转基因植株。对部分潮霉素抗性植株进行了PCR初步鉴定，尚未发现转基因阳性植株，相关的检测工作有待今后进行。