目的 寻求简便、准确、适合临床常规用于检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC β-内酰胺酶(AmpC酶)的方法,研究革兰阴性杆菌中ESBLs、AmpC酶的检出情况及耐药特点,并检测阴沟肠杆菌AmpC酶的基因型别.方法(1)采用纸片扩散确证、VITEK自动化微生物分析系统(VITEK-AMS)、纸片扩散筛选和双纸片协同等方法检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs的产生,并进行方法评价.(2)采用酶提取物三维试验、头孢西丁三相试验及氯唑西林双纸片协同法检测阴沟肠杆菌和鲍曼不动杆菌的AmpC酶的产生情况,并进行方法评价.(3)用头孢曲松酶提取物三维试验和纸片扩散确证法检测阴沟肠杆菌ESBLs的产生,并进行方法评价.(4)采用多重聚合酶链反应(PCR)检测阴沟肠杆菌AmpC酶基因.(5)采用VITEK-AMS和K-B纸片扩散法检测ESBLs、AmpC酶阳性及阴性菌株对多种抗生素的耐药性,研究产酶菌株的耐药特点.(6)比较分离自住院患者和社区患者标本的大肠埃希菌ESBLs产生情况:探讨ESBLs、AmpC酶产生菌的痫区和菌种分布:采用多因素回归分析的方法研究ESBLs产生的危险因素.结论(1)ESBLs、AmpC酶的检测应扩展到所有的革兰阴性杆菌.(2)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs的检测可用纸片扩散法确证法和纸片协同法;其他革兰阴性杆菌ESBLs的检测应用头孢曲松酶三维试验.(3)检测AmpC酶最理想的方法是酶提取物三维试验;氯唑西林双纸片协同法可应于临床常规检测.(4)PCR产物电泳结果显示,本研究从阴沟肠杆菌中检测出的AmpC酶为质粒AmpC酶.(5)产ESBLs菌感染的治疗以亚胺培南和酶抑制剂复合剂为首选.(6)产AmpC酶菌感染的治疗首选亚胺培南,但对产AmpC酶的鲍曼不动杆菌,酶抑制剂复合剂头孢哌酮/舒巴坦有较好的抑菌效果.