【摘 要】
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肠道病毒71(Enterovirus71，EV71)属于小核糖核酸病毒科，是引起儿童手足口病的主要病原体。小核糖核酸病毒的复制是由VPg的尿苷化起始的，此过程需要依赖于RNA的RNA聚合酶（RNAdepen
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肠道病毒71(Enterovirus71，EV71)属于小核糖核酸病毒科，是引起儿童手足口病的主要病原体。小核糖核酸病毒的复制是由VPg的尿苷化起始的，此过程需要依赖于RNA的RNA聚合酶（RNAdependentRNApolymerase，RdRp）并且是后续病毒负链RNA合成所必须的。尿苷化过程需要VPg、模板、UTP、聚合酶和/或其前体形式等多种组分。然而，现有报道表明小核糖核酸病毒VPg的尿苷化机制各不相同，尤其是RdRp与VPg的结合位点。本论文中，我们鉴定出位于EV71RdRp上的311-317位氨基酸，这些位点在VPg尿苷化和EV71复制过程中发挥关键作用。我们发现所选取的七个位点中有四个位点(I311、T313、F314和I317)是复制所必须的。将这四个位点用甘氨酸(Gly)取代后不影响RdRp的活性，表明这些位点是通过非酶催化机制发挥作用的。生化和细胞实验表明这四个位点通过与VPg的结合影响RNA合成的起始。因此，我们的结果为EV71RdRp上VPg的结合位点提供了直接证据。
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