沟叶结缕草(Zoysia matrella[L.]Merr.)又名马尼拉，是一种优良的暖季型草坪草，广泛应用于我国南方大部分地区。沟叶结缕草在自然界中通过匍匐茎无性繁殖，无法用杂交育种等传统方法对其进行遗传改良，因此，体细胞无性系变异等生物技术在沟叶结缕草育种、抗逆性和观赏性状改良中有着重要作用。　　 本试验以继代了5年的沟叶结缕草匍匐茎诱导的胚性愈伤组织为材料，比较了不同培养温度(4℃和25℃)对愈伤组织胚性保存和再生的影响，不同辐射剂量(0、5、10、20、40、80、100、150、200、250、300 Gy)的60Coγ射线对愈伤组织生长再生的影响。同时，对愈伤组织进行了氯化钠(NaCl)和草甘膦(Glyphsoate)筛选，获得了少量抗性植株，并对这些植株的田间抗性进行了检测，对抗盐植株在NaCl胁迫下的抗氧化酶活性和脯氨酸含量变化进行了研究。　　 主要研究结果如下：　　 1.经过4℃培养后，愈伤组织再生速度减慢，因此6周后愈伤组织再生率显著低于25℃培养的愈伤组织。不同培养时间后，再生的外植体比率波动较大。前11个月中，具有再生能力的愈伤组织比率保持在91.7％-97.9％之间，与25℃条件下持平。只有当愈伤组织在4℃条件下培养了13个月后，具有再生能力的愈伤组织比率才显著下降至58.3％。当愈伤组织在4℃培养19个月后，所有愈伤组织都失去了再生能力。　　 2.当辐射剂量为20 Gy时，愈伤组织的具有再生能力的愈伤组织比率和再生率达到最高，分别为97.71％和27.08％。当辐射剂量为100 Gy时，10.42％的愈伤组织再生成了小苗。当辐射剂量≥150 Gy时，具有再生能力的愈伤组织比率和再生率都显著下降。　　 3.根系健全植株(NR)和去根植株(NN)在含0.3 M NaCl的再生培养基上培养6周后，株高和根长都显著低于普通再生培养基上培养6周的根系健全植株(CR)和去根植株(CN)，表明NaCl显著抑制了试管苗叶片和根系的生长。CR和CN的植株存活率并不存在显著性差异，表明剪除根系对植株存活没有显著影响。CR和CN的存活率显著高于NR和NN，而NR的存活率又显著高于NN，表明0.3 M NaCl对植株的存活有显著影响，但是根系可以有效的减小NaCl对植株的伤害。NR和NN叶片的长宽比显著低于CR和CN，说明叶片在NaCl胁迫下变得粗短。　　 4.通过两轮愈伤组织NaCl筛选，有大约60％的愈伤组织存活下来。但是，仅0-100 Gy的每个辐射梯度有少数愈伤组织在含2.5 M NaCl的再生培养基上再生成了小苗。对0、5、10、20、40 Gy辐射组的再生植株，Ze1、Fv1、Te1、Tw1和Fr1进行了抗盐性测定，以未经过辐射处理和NaCl筛选的再生植株作为对照组(CK组)。在盐处理的第5天，CK组的叶片首先出现了枯黄的现象。盐处理结束后的第7天，Ze1、Fv1、Te1和Fr1组仅15，24，16和8％的叶片出现枯黄，而CK组56％的叶片都出现了枯黄。Ze1、Fv1、Te1和Fr1组的DGCI值(30.88、31.17、30.45和37.70)显著高于CK组(27.39％)，Tw1组(25.82％)则和CK组不存在显著性差异。　　 5.正常生长条件下，不同植株的脯氨酸含量之间均不存在显著性差异，NaCl处理组和对照组的脯氨酸含量之比在0.94-1.09之间。盐处理后，CK、Ze1、Fv1、Te1和Fr1的NaCl处理组和对照组脯氨酸含量之比分别升高至5.95、3.12、2.78、1.84和3.45。Ze1对照组的SOD活性显著高于植株的对照组，其NaCl处理组的POD和CAT活性与对照组相比显著升高。Fr1的NaCl处理组的CAT活性与其对照组相比显著升高，并显著高于其他植株的NaCl处理组。　　 6.在两轮草甘膦筛选中，分别有43.5％和60％的愈伤组织存活了下来，并转移到了不含草甘膦的再生培养基上培养。8周后，将成功再生的小苗转移到添加了0.05 M草甘膦的再生培养基上。4周后，叶尖开始焦黄枯萎。8周后，抗草甘膦植株中，10％的叶片仍保持绿色，而对照组中，所有的叶片都枯黄或枯萎干瘪。在实验中我们还发现，有新的小苗从枯死的植株周围再生，部分茎节长出了根系，并伸长到培养基中。　　 7.喷施草甘膦2周后，对照组中，70％的叶片都发生了枯黄的现象，20％的叶片枯萎死亡，并且大都集中在草坪的下层。在抗草甘膦植株中，30％的叶片发生了枯黄现象，并且大都集中在植株11、12和13。喷施草甘膦4周后，对照组中，90％的叶片都枯萎死亡，但抗草甘膦植株中，枯黄的叶片量并没有继续增长，并且，植株31和32逐渐从草甘膦的伤害中恢复了过来。